一种利用离子液体及酶法提取分离饼粕中蛋白质的方法

摘要

本发明涉及蛋白质的分离纯化领域，具体地，本发明涉及一种用离子液体及酶法提取分离饼粕中蛋白质的新方法。根据本发明所述的用离子液体及酶法提取分离饼粕中蛋白质的方法包括以下步骤：1)将原料饼粕粉碎过筛，脱脂，得到脱脂饼粕粉；2) pH7~10，温度40~65 ℃，料液比1:7~1:15条件下将脱脂饼粕粉进行酶解，总酶活为90~250 U·g -1，酶解2~5 h后离心分离；3)步骤2) 所得的沉淀和酶解液进行碱溶酸沉，冷冻干燥，得到粗蛋白品；4)将步骤3)中的粗蛋白加到离子液体/盐双水相体系中，在温度40~70 ℃，pH 4~9下分离纯化蛋白；5)将步骤4)中的离子液体相用膜分离法分离蛋白质并且回收离子液体，冷冻干燥得到高纯度蛋白粉。本发明的操作简单、无污染，蛋白质纯度高且保持其生物活性，是一种绿色节能且高效的蛋白质分离纯化新方法。

主权项

一种利用离子液体及酶法提取分离饼粕中蛋白质的方法，其特征在于包括以下步骤：(1) 将原料饼粕粉碎过筛后用有机溶剂脱脂，得到脱脂饼粕粉；(2) 将步骤(1)所述的脱脂饼粕粉与pH值为7~10的缓冲溶液混合后加入复合酶制成混合液，将混合液在40~65 ℃条件下酶解2~5 h后，离心分离，得到酶解液和沉淀；所述脱脂饼粕粉与缓冲溶液的料液质量比为1:7~1:15，所述混合液中的总酶活为90~250 U·g ‑1；(3) 然后将步骤(2)所述的沉淀碱溶后离心分离，将分离得到的上清液与步骤(2)所述的酶解液合并后，进行酸沉并离心分离，将沉淀水洗后冷冻干燥，得到粗蛋白；(4) 将步骤(3)得到的粗蛋白加到离子液体/盐双水相体系中，在温度40~70 ℃、pH4~9的条件下震荡后再静置，取上层离子液体相；(5) 最后将步骤(4)的离子液体相用膜分离法分离蛋白质，并回收离子液体，将蛋白质冷冻干燥得到高纯度蛋白粉。