蓝莓组织培养的方法及其专用培养基

摘要

本发明公开了一种蓝莓组织培养的方法及其专用培养基。本发明的专用培养基为蓝莓组织培养的初代培养基，是在基本培养液中添加如下物质得到的固体培养基：玉米素、NAA、碳源和凝胶剂；初代培养基中玉米素的终浓度是2-5mg/L，NAA的终浓度是0.01-0.12mg/L，基本培养液的溶剂是水、溶质如表1所示。实验证明本发明的初代培养基可大大缩短组织培养的培养周期，可将培养周期由3个月缩短至2个月，芽的诱导率达90％以上，年组培苗生产能力可达300万株以上。本发明的方法具有高效省时的特点，生产组培苗的成本低廉，平均每株种苗成本1.5元/株，得到的蓝莓组培苗，遗传性状一致，克服了常规繁殖系数低的缺点。

主权项

一种生产蓝莓苗的方法，包括以下步骤：将蓝莓的外植体置于初代培养基上进行诱导分化培养，得到初代组培苗；再将初代组培苗置于继代培养基中进行继代培养，得到继代苗；所述初代培养基是在基本培养液中添加如下物质得到的固体培养基：玉米素、NAA、碳源和凝胶剂；所述初代培养基中玉米素的终浓度是2‑5mg/L、NAA的终浓度是0.01‑0.12mg/L；所述继代培养基是在基本培养液中添加如下物质得到的固体培养基：玉米素、NAA、IBA、碳源和凝胶剂；所述继代培养基中玉米素的终浓度是1.5‑4mg/L、NAA的终浓度是0.04‑0.1mg/L、IBA的终浓度是0.1‑0.5mg/L；所述基本培养液的溶剂是水、溶质及其在基本培养液中的浓度如下：NH4NO3400mg·L‑1、K2SO4 990mg·L‑1、MgSO4·7H2O 370mg·L‑1、KH2PO4 170mg·L‑1、Ca(NO3)2·4H2O556mg·L‑1、CaCl2 92mg·L‑1、FeSO4·7H2O 27.8mg·L‑1、Na2EDTA 37.3mg·L‑1、MnSO4·4H2O  22.4mg·L‑1、ZnSO4·7H2O  8.6mg·L‑1、H3BO36.2mg·L‑1、Na2MoO4·2H2O0.25mg·L‑1、CuSO4·5H2O 0.25mg·L‑1、盐酸硫胺素1.0mg·L‑1、盐酸吡哆醇0.5mg·L‑1、烟酸0.5mg·L‑1、甘氨酸2.0mg·L‑1、肌醇100mg·L‑1；所述诱导分化培养的培养条件为：光照强度为4000‑4500Lx；光照时间为14‑16小时/天；光照培养时温度为20‑24℃，黑暗培养时温度为16‑20℃；湿度为60％‑75%；所述继代培养的培养条件为：光照强度为3000Lx，光照时间为14‑16小时/天；光照培养时温度为20‑24℃，黑暗培养时温度为18‑22℃；湿度为60%‑75%。