一种高透明度小核菌葡聚糖的制备方法

摘要

本发明涉及一种高透明度小核菌葡聚糖的提取方法，该方法主要是将小核菌发酵液升温至70-100℃，后迅速冷却至室温，采用的是二步酶解方法，第一步采用蛋白酶降解发酵液和菌丝体中的蛋白质，第二步采用破壁酶降解小核菌细胞壁，使胞内多糖进一步溶出，将提取的小核菌葡聚糖用水复溶，再用活性炭脱色，离心，清液采用0.5μm-5μm的膜过滤，得到高透明度小核菌葡聚糖溶液。本发明所获得的小核菌葡聚糖具有皮肤保湿功效，同时提升皮肤自体的修复能力，显著增强和恢复组织弹性等作用，主要用于轻工、医药、化妆品领域。

主权项

一种高透明度小核菌葡聚糖的提取方法，其特征在于：由下述工艺步骤完成：（1）发酵液预处理：将小核菌发酵液升温至70℃‑100℃，保温10min‑60min，冷却至室温;（2）酶解：采用下述方式中的任意一种进行酶解：A．用碱性物质调节预处理发酵液pH值为7.5‑9.0，开启搅拌，加入w/v为0.01‑0.2%蛋白酶，升温到50‑60℃，反应2‑8h，将所得的酶解溶液冷却至35℃，用酸性物质调节pH6.0，然后加入w/v为0.01‑0.2%破壁酶，继续搅拌1‑5h，酶解液加热至80‑100℃，保温20‑60min;B.用酸性物质调节pH6.0，然后加入w/v为0.01‑0.2%破壁酶，35‑45℃搅拌1‑5h，用碱性物质调节预处理发酵液pH值为7.5‑9.0，，加入w/v为0.01‑0.2%蛋白酶，升温到50‑60℃，反应2‑8h，酶解液加热至80‑100℃，保温20‑60min;（3）乙醇醇析：将步骤（2）中获得的酶解液冷却至4‑40℃，固液分离，清液加入乙醇，控制溶液中的乙醇浓度在v/v为40%‑80%，混合搅拌30‑90min，固液分离得小核菌葡聚糖沉淀;（4）纯化：小核菌葡聚糖用水复溶，控制小核菌葡聚糖浓度w/v为0.5‑3％，加入w/v为0.05‑2%的活性炭，60‑100℃保温20‑60min，冷却至室温后，3000‑6000r/min离心，清液8000‑13000r/min再离心，清液采用0.2μm‑2μm的膜过滤，得到高透明度的小核菌葡聚糖溶液。