发明名称 一种用于检测牙鲆感染β诺达病毒的特异性引物及其检测方法
摘要 本发明涉及用于检测牙鲆感染β诺达病毒的特异性引物及其检测方法。本发明针对靶基因序列的6个关联区域,设计4条特异性引物,确保检测的特异性和准确性;采用具有逆转录效力的方案,使整个检测可在一只PCR管中完成,只需一次加样,减少人为操作干扰,90分钟可完成检测,且不需昂贵设备;反应结束后加入SYBRGREENI染料即可通过肉眼快速辨识阳性结果,紫外辅助观察可进一步提高检测灵敏度,该方法的检出限与操作繁琐的RT-PCR相当;本发明检测样品可以是病灶组织的粗提液或是由其抽提的RNA,还可以是反转录获得的cDNA,因此非常适合用于现场定性和定量检测,在水产养殖病害防治中有着较高的推广应用价值。
申请公布号 CN102367495B 申请公布日期 2012.11.28
申请号 CN201110407736.7 申请日期 2011.12.09
申请人 天津师范大学 发明人 孙金生;张亦陈;刘逸尘;耿绪云;顾中华;杜宏薇
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 代理人 朱红星
主权项 一种用于检测牙鲆感染β诺达病毒的特异性引物,其特征在于:包括2条N2L2fw和N2L2rw外侧引物序列:CGTCCGCTGTCCATTGAC和GGGGCTGCTCATCAGAGT;2条N2L2fn和N2L2rn内侧引物序列:GCAGGTGTGCCAGCATTTCCTTTTTACAGCCTTGGAACTGGAGA和CTGGTTTCGCTGGGGCATCTTTTTGTAGGCAACGCCATCTGTG。
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