位点特异性丝氨酸重组酶和它们的使用方法

摘要

本发明提供了在真核细胞中获得位点特异性重组的方法，所述方法包括：提供包含第一重组附着位点和第二重组附着位点的真核细胞；将所述第一和第二重组附着位点与原核重组酶多肽接触，导致在所述重组附着位点之间产生重组，其中重组酶多肽能够介导第一和第二重组附着位点之间的重组，所述第一重组附着位点是噬菌体基因组重组附着位点(attP)或细菌基因组重组附着位点(attB)，所述第二重组位点是attB或attP，所述重组酶选自单核细胞增生李斯特氏菌噬菌体重组酶、化脓性链球菌噬菌体重组酶、枯草芽孢杆菌噬菌体重组酶、结核分枝杆菌噬菌体重组酶和耻垢分枝杆菌噬菌体重组酶，条件是当第一重组附着位点是attB时，第二重组附着位点是attP；当第一重组附着位点attP时，第二重组附着位点是attB。本发明也描述了用于产生转基因细胞、组织、植物和动物的组合物、载体和其使用方法。本发明的组合物、载体和方法也可用于基因治疗用途。

主权项

在分离的真核细胞中获得位点特异性重组的方法，所述方法包括：提供包含第一重组位点和第二重组位点的分离的真核细胞；将所述第一和第二重组位点与原核重组酶多肽接触，从而在所述重组位点之间产生重组，其中所述重组酶多肽能够介导所述第一和第二重组位点之间的重组，所述第一重组位点是噬菌体基因组重组附着位点attP或细菌基因组重组附着位点attB，所述第二重组位点是attB或attP，所述重组酶是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)噬菌体重组酶或耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)噬菌体重组酶，条件是当第一重组附着位点是attB时，所述第二重组附着位点是attP；当第一重组附着位点是attP时，第二重组附着位点是attB。