拆分消旋体γ-内酰胺活性的（+）γ-内酰胺酶及应用

摘要

本发明提供一种具有拆分消旋体γ-内酰胺活性的（+）γ-酰胺酶及编码基因在手性化合物上的应用；及利用一种以大豆慢生根瘤菌生产（-）γ-内酰胺的方法。提取大豆慢生根瘤菌基因组DNA，构建用于提取重组蛋白的重组菌体，再通过表达得到所述的（+）γ内酰胺酶；将所述的用于提取重组蛋白的重组菌体或（+）γ内酰胺酶悬浮在的磷酸缓冲液中加入γ内酰胺底物反应、萃取获得（-）γ-内酰胺。或提取大豆慢生根瘤菌基因组DNA，构建用于提取重组蛋白的重组菌体，再通过表达得到所述的（+）γ内酰胺酶，加入底物反应、萃取获得（-）γ-内酰胺。本发明中的（+）γ-内酰胺酶源于大豆慢生根瘤菌，催化效率高，得到的（-）γ-内酰胺纯度高。

主权项

一种具有拆分消旋体γ‑内酰胺活性的（+）γ‑内酰胺酶，其特征在于：所述的（+）γ‑内酰胺酶是如下（a）或（b）的蛋白质：（a）其氨基酸序列组成为：序列表中的SEQ ID No:1；（b）将序列表中的SEQ ID No:1的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸的取代、和/或缺失、和/或添加，且具有拆分消旋体γ‑内酰胺活性的由SEQ ID No:1衍生的蛋白质。