一种饲用复合微生物制剂的生产方法

摘要

本发明公开了一种饲用复合微生物制剂的生产方法，它包括菌剂制作、配料、枯草芽孢杆菌培养基的制备、啤酒酵母培养基的制备和植物乳杆菌培养基的制备等步骤。本发明将枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、植物乳杆菌三种菌种经选育形成复合菌种，提高了复合菌体的总数，具有菌种存活率、稳定性强等优点，与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖以良好的配比混合，使其形成最佳的复合比例，为其畜禽肠道内环境的形成创造了良好的条件，好氧菌枯草芽孢杆菌和酵母菌相互作用产生更多营养物质和淀粉酶、蛋白酶纤维素等，同时还能耗去畜禽肠道内的氧气，为乳酸菌的繁殖创造了良好的生长环境，改善畜禽的肠道功能，提高饲料转化率，改善生畜禽肠道微生态平衡。

主权项

一种饲用复合微生物制剂的生产方法，其特征在于：它包括以下步骤：（1）将枯草芽孢杆菌种、啤酒酵母菌种和植物乳杆菌种分别接种于枯草芽孢杆菌培养液、啤酒酵母培养液和植物乳杆菌培养液中，分别收集菌体后制成粉剂；（2）将步骤（1）制得的枯草芽孢杆菌粉剂、啤酒酵母菌粉剂和植物乳杆菌粉剂，与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖混合，经称量、包装后生产出粉剂型饲用复合微生物制剂，其中，所述的饲用复合微生物制剂中各组分的重量百分比为：球磨糠15～25%、麸皮74～84%、低聚异麦芽糖0.02～1%，其中枯草芽孢杆菌数≥2×107cfu/g、啤酒酵母菌数≥5×106cfu/g和植物乳杆菌数≥4.5×106cfu/g，水分≤10.0%；其中，所述的枯草芽孢杆菌培养液及枯草芽孢杆菌培养方法为：将葡萄糖5g、蛋白胨10g、牛肉膏5g、氯化钠5g和水1000mL一并装入摇瓶中，在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌20min后冷却到37℃，将保存的枯草芽孢杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中，摇瓶工作时的转速为160rmp，温度37℃，发酵24h，pH控制在7.4；然后再转入在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌30min的50L种子发酵罐，发酵罐转速160rmp，温度37℃，发酵24h，风量2.5～3m3/h，pH为7.4，压力0.05～0.1MPa；接着再转入温度在121℃，压力0.1MPa条件下灭菌30min的500L发酵罐，发酵罐转速160rmp，温度37℃，发酵24h，风量15‑20m3/h，pH为7.4，压力0.05～0.1MPa，将发酵好后的培养液通用高速管式离心机富集菌体后再通过喷雾干燥收集，喷雾干燥的配方重量比为：麦芽糊精20，CaCl2 1，菌体10，喷雾干燥时入口温度170℃、出口温度55℃、压力2‑3kg/cm2；所述的啤酒酵母培养液及啤酒酵母菌培养方法为：将酵母膏5g、蛋白胨6g、葡萄糖20g和蒸馏水1000mL一并装入摇瓶中，在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌20min后冷却到30℃，将保存的啤酒酵母斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中，摇瓶工作时的转速160rmp，温度30℃，发酵24h，pH保持自然；然后再转入在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌30min的50L种子发酵罐，发酵罐的转速160rmp，温度30℃，发酵24h，风量2.5～3m3/h，pH自然，压力0.05～0.1MPa；接着再转入在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌30min的500L发酵罐，500L发酵罐的转速160rmp，温度30℃，发酵48h，风量15～20m3/h，PH自然，压力0.05～0.1MPa，将发酵好后的培养液通用高速管式离心机富集菌体后再通过冷冻干燥收集，冷冻干燥的配方重量比为：海藻糖10、奶粉10、菌体5，冷冻干燥时真空度1.29×101MPa、隔板温度45℃、压缩机温度‑33～‑35℃、干燥时间18‑20h；所述的植物乳杆菌培养液及植物乳杆菌培养方法为：将蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母提取物5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、磷酸氢二钾2.0g、三水醋酸钠5.0g、四水硫酸锰0.25g、七水硫酸镁0.58g、葡萄糖20g、吐温80 1.0 mL和蒸馏水1000 mL一并装入摇瓶中，在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌20min后冷却到37℃，将保存的植物乳杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中，摇瓶工作温度37℃，发酵24h，pH调节为6.2～6.4；然后再转入在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌30min的50L种子发酵罐，发酵罐温度37℃，发酵24h，pH6.2～6.4，压力0.05～0.1MPa；接着再转入在温度121℃，压力0.1MPa条件下灭菌30min的500L发酵罐，500L发酵罐温度37℃，发酵72h，pH6.2～6.4，压力0.05～0.1MPa，将发酵好后的培养液通用高速管式离心机富集菌体后再通过冷冻干燥收集，冷冻干燥的配方比例：海藻糖10、奶粉10、菌体5，冷冻干燥时真空度1.29×101MPa、隔板温度45℃、压缩机温度‑33～‑35℃、干燥时间18‑20h；所述的高速管式离心机的转速达16000rmp，能够有效分离菌体达99%以上。