核酸的定量方法

摘要

本发明提供一种核酸的定量方法。本发明提供的方法是克服以往的处方法的缺点、新型简便的DNA定量分析方法。本发明的方法中，制备在靶DNA中导入有单碱基置换的标准DNA试样，将一定量的该试样与靶DNA试样混合，用相同的引物扩增靶DNA和标准DNA，使其包含所述单碱基置换部位，使用结合于所述单碱基置换部位前一个部位的探针，将ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP一种一种地顺次加入，进行互补链合成反应，通过荧光素酶反应检测来自生成的焦磷酸的发光，由检测的发光量和加入的标准DNA试样的量来对靶DNA进行定量。

主权项

一种非诊断目的的核酸的定量方法，其包括以下工序：(1)在靶DNA试样中混合一定量的置换碱基及浓度不同的多个标准DNA试样的工序，所述标准DNA试样是在所述靶DNA的至少一部分中导入单碱基置换而得到的；(2)使用引物扩增混合后的试样的工序，所述引物被设计成用来扩增包含所述单碱基置换部位的区域；(3)将扩增后的试样单链化，使结合于所述单碱基置换部位前一个部位的探针杂交，将ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP一种一种地顺次加入，进行互补链合成反应的工序；(4)通过荧光素酶反应，检测来自在所述互补链合成反应中生成的焦磷酸的发光的工序；(5)由检测的发光量和所述标准DNA试样的量来定量靶DNA的工序。