利用拉曼光谱检测指纹中潜在信息的方法

摘要

本发明属于检测技术领域，具体涉及显现潜指纹并利用拉曼光谱检测潜指纹的潜在信息的方法。本发明是在显现汗液潜指纹的同时，用抗体特异性识别技术结合拉曼光谱法分析检测显现后的指纹代谢物中的特异性蛋白等潜在信息。首先选择需要检测的目标代谢物的抗体，和具有特征拉曼信号的分子修饰金纳米颗粒，制成检测探针，将该探针与待测的指纹作用，使抗体通过特异性作用与被测指纹中的目标代谢物相结合发生免疫反应，然后利用银染法将银在指纹表面被还原，将样品测试拉曼光谱。该方法能够准确检测指纹中汗液某种特征代谢物的存在，灵敏高、快速、易操作，具备特异性。

主权项

利用拉曼光谱检测指纹中潜在信息的方法，其特征是：1)、探针的制备：首先利用柠檬酸钠作还原剂制备15nm的金纳米颗粒，然后将可天宁的抗体即抗可天宁与拉曼信号分子对巯基苯胺或对巯基苯甲酸分别修饰在金纳米颗粒上，制备成可天宁的检测探针，具体步骤如下：100mL的1mM/L氯金酸溶液加热煮沸后，边搅拌边加入10mL的38.8mM/L柠檬酸钠溶液，继续加热15分钟后，搅拌至溶液温度降至室温，所得溶液为红色的金纳米颗粒溶液，尺寸为15nm，取4‑5mL金纳米颗粒与20‑50μL的10‑4‑10‑6M/L抗可天宁溶液充分混合10‑24小时后，离心弃去未反应的抗体重新分散到等量的超纯水中即得到抗可天宁标记的金纳米颗粒，然后将对巯基苯胺、或对巯基苯甲酸20‑50μL的0.1mM/L加入继续垂直混合10‑24小时，然后离心弃去未反应的拉曼分子对巯基苯胺或对巯基苯甲酸，重新分散到超纯水中，得到由抗可天宁和对巯基苯胺或对巯基苯甲酸标记的金纳米探针，即特异性标识的检测探针；2)、检测指纹代谢物：将上述制备的金纳米探针探针滴在待测的指纹样品上，静置5‑20分钟，使金纳米探针表面的抗体与指纹的残留汗液代谢物中的可天宁充分反应，将金纳米探针通过特异性的作用固定在指纹表面，然后用大量的水冲洗指纹样品5‑10分钟，将未反应的金纳米探针冲洗掉，接着将指纹样品放入由0.02克硝酸银，0.5克对苯二酚，5mLpH为3.8的柠檬酸缓冲溶液和15mL水混合后配制而成的银染溶液中5‑15分钟，使银在指纹中固定存留的金探针的催化作用下被还原并沉积在金纳米探针的表面，取出指纹样品后再用大量水冲洗，然后测试指纹样品在488nm或514nm拉曼光谱，若得到标记拉曼分子的特征峰则表明指纹样品中有尼古丁的代谢物‑可天宁的存在，证明提供指纹者吸烟，否则说明指纹样品中没有可天宁的存在，证明提供指纹者不吸烟。