定向诱导合成金属硫蛋白的工艺

摘要

定向诱导合成金属硫蛋白的工艺，属于生物工程领域。针对现有金属硫蛋白来源的局限性，本发明的定向诱导合成金属硫蛋白的工艺是通过以下技术方案实现的：1、选择合适的原材料配制培养基；2、培养基二次发酵复制；3、九龙虫虫卵培殖；4、九龙虫虫卵植入复制培养基中；5、超声波振荡培育；6、九龙虫成虫处理；7、微滤与超滤；8、超声驻波液相制备色谱分离纯化；9、冷冻干燥至成品。本发明不仅为金属硫蛋白生产提供了一种新的工艺，而且由于分离过程的特殊性，确保了金属硫蛋白的生物活性，具有工业化生产的价值。

主权项

定向诱导合成金属硫蛋白的工艺，其特征在于所述工艺如下：（1）选择合适的原材料配制培养基；（2）上述培养基喷淋去离子水，保持温度25~45℃，时间48~120h，使培养基充分发酵；（3）将九龙虫雄虫与雌虫按2：3比例混合，保持温度25~30℃，湿度60~85%，雄虫与雌虫交配5~7天产卵，虫卵在8~12天孵化出幼虫，收集幼虫；（4）将5~8g幼虫置于前述的发酵培养基中，保持温度20~30℃、湿度60~85%培养，待幼虫第一次脱皮后超声波振荡培育；（5）待幼虫脱皮6次后的第4~6天，收集九龙虫幼虫，用去离子水清洗，甩干九龙虫幼虫表面水分；（6）甩干的九龙虫幼虫捣碎，加热80~100℃，时间5~10min，离心分离，收集分离液；（7）分离液进行微滤与超滤处理，收集浓缩液；（8）100mL浓缩液溶于1000~2000mL溶剂体系中，泵入超声驻波液相制备色谱里连续分离纯化金属硫蛋白；（9）将分离纯化的金属硫蛋白冷冻干燥至成品。