发明名称 一种动物干扰素的制备方法
摘要 本发明涉及一种制备动物干扰素的方法。本发明方法的实施步骤如下:(1)无菌采取实验鸡脾脏,用脾脏制备淋巴细胞悬液,加入10μg/ml卡那霉素,用配置好的培养液稀释淋巴细胞悬液;(2)鸡脾淋巴细胞中加入为每ml含105少量干扰素,于37℃水浴培养0.5-2小时;(3)再加入黄芪多糖,使其最终浓度为25-100μg/ml,于37℃水浴培养1-2小时;(4)然后在上述鸡脾淋巴细胞悬液中再加入适量干扰素诱生剂仙台病毒;(5)待干扰素达到高峰值时,离心收集上清,即得粗制动物干扰素。该方法生产的干扰素含量高,生产成本明显降低。
申请公布号 CN102154418B 申请公布日期 2012.11.21
申请号 CN200910303630.5 申请日期 2009.06.25
申请人 天津艾森生物工程有限公司 发明人 王文彪;王丽莉
分类号 A61K38/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I 主分类号 A61K38/21(2006.01)I
代理机构 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 代理人 闫俊芬
主权项 一种动物干扰素的制备方法,其特征在于具体实施步骤如下:(1)无菌采取实验鸡脾脏,用脾脏制备淋巴细胞悬液,加入10μg/ml卡那霉素,用配置好的培养液稀释淋巴细胞悬液,使鸡脾淋巴细胞浓度稀释为每ml含1×105‑1×107;(2)对淋巴细胞单层进行传代培养;(3)鸡脾淋巴细胞中加入少量干扰素,使其最终浓度为100‑1000IU/ml,于37℃水浴培养0.5‑2小时;(4)再加入黄芪多糖,使其最终浓度为25‑100μg/ml,于37℃水浴培养1‑2小时;(5)然后在上述鸡脾淋巴细胞悬液中再加入适量干扰素诱生剂仙台病毒,使其最终浓度为128‑1280血凝单位/ml,37℃条件下旋转培养18‑24小时;(6)待干扰素达到高峰值时,离心收集上清,加入盐酸调至pH2.0,4.0℃,放置1‑4天,灭活病毒,再加NaOH调至pH 7.0,即得粗制动物干扰素。
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