发明名称 |
猪α干扰素成熟蛋白重组腺病毒及其构建方法与应用 |
摘要 |
本发明涉及一种猪α干扰素成熟蛋白重组腺病毒及其构建方法与应用,它是将猪α干扰素表达基因插入到穿梭载体pShuttle-CMV中,制得pShuttle-CMV-mIFNα;然后将pShuttle-CMV-mIFNα与腺病毒骨架载体pAdEasy-1发生同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd-mIFNα;再经脂质体转染细胞、包装,获得猪α干扰素成熟蛋白重组腺病毒rAd-mIFNα。本发明构建的猪α干扰素成熟蛋白重组腺病毒外源蛋白表达稳定,且滴度高而稳定,重组腺病毒的滴度稳定在108.67TCID50/mL,与现有干扰素相比,本发明构建的重组腺病毒滴度提高了10000倍。 |
申请公布号 |
CN102787102A |
申请公布日期 |
2012.11.21 |
申请号 |
CN201210324020.5 |
申请日期 |
2012.09.04 |
申请人 |
山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
发明人 |
孙文博;王金宝;黄保华;吴家强;宋恩亮;杜以军;李俊;丛晓燕;时建立;任素芳;吕伟;郭立辉 |
分类号 |
C12N7/01(2006.01)I;C12N15/21(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61K38/21(2006.01)I;A61P31/12(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12N7/01(2006.01)I |
代理机构 |
济南金迪知识产权代理有限公司 37219 |
代理人 |
王绪银 |
主权项 |
一种猪α干扰素成熟蛋白重组腺病毒,其特征在于,将猪α干扰素表达基因插入到穿梭载体pShuttle‑CMV中,制得pShuttle‑CMV‑mIFNα;然后将pShuttle‑CMV‑mIFNα与腺病毒骨架载体pAdEasy‑1发生同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd‑mIFNα;再经脂质体转染细胞、包装,获得猪α干扰素成熟蛋白重组腺病毒rAd‑mIFNα。 |
地址 |
250100 山东省济南市历城区桑园路8号 |