一种冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物及其在制备抗疲劳产品的应用

摘要

本发明涉及一种冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物及其在制备抗疲劳产品方面的用途。其特征是通过将野生冬虫夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.子实体通过菌种收集、保藏与复壮，母种、一级液体种和二级生产种的制作，固体发酵物的制备，固体发酵提取物的提取等步骤制备得到本发明的冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物。本发明制备冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物的方法与常用的液体发酵法相比较具有工艺简单，环保，无废液排放，成本低廉等特点，因此具有广泛的实用性和可操作性。经实验证明由本发明方法制备的冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物能显著延长小鼠负重游泳时间，因此具有良好的抗疲劳作用，可用于制备抗疲劳产品。

主权项

一种冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物，其特征是由包括以下步骤的方法制备得到：（1）将野生冬虫夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.子实体进行组织分离，于冬虫夏草斜面培养基上培养，获得纯菌株，并进行复壮，所述的冬虫夏草斜面培养基按其总质量分数100%计，由葡萄糖1%～2%，蛋白胨0.5%～1%，麦芽浸出粉0.3%～0.5%，酵母浸膏0.3%～0.5%，琼脂2%和余量的水组成；（2）将步骤（1）的纯菌株接入无菌的冬虫夏草斜面培养基中，10～15℃下，暗培养30～35天后，光照4～6天，选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种，作为母种，所述的冬虫夏草斜面培养基组成与步骤（1）相同；（3）将上述母种经复壮挑选后接至无菌冬虫夏草液体培养基中，振荡培养10～20天，选取菌丝球大小均匀一致、直径为2～3mm的菌种作为一级液体菌种，所述的冬虫夏草液体培养基pH 6.0～6.5，按其总质量分数100%计，由葡萄糖1%～2%，蛋白胨0.5%～1%，麦芽浸出粉0.3%～0.5%，酵母浸膏0.3%～0.5%和余量的水组成；（4）将步骤(3)得到的一级液体菌种接入冬虫夏草液体培养基中进行培养，一级液体菌种体积是冬虫夏草液体培养基体积的3%～10%，选取菌丝球大小均匀一致、直径为2～3mm的菌种作为二级生产种，所述的冬虫夏草液体培养基及培养方法与步骤(3)相同；（5）在无菌的环境下，将上述二级生产种用无菌水按体积比1:1～1.3稀释后接入无菌的固体发酵培养基中，进行避光培养9～14天至菌丝长满培养基后，进行光照培养，光强400～1000 lx，空气相对湿度80%～90%，10～15℃，经7～12天后得到冬虫夏草菌丝体固体发酵物，所述的固体发酵培养基是按1kg大米和1～1.3L营养液的比例配制而成，所述的营养液pH6.0～6.5，按总质量分数100%，由葡萄糖1%～2%，蛋白胨0.5%～1%，麦芽浸出粉0.3%～0.5%，酵母浸膏0.3%～0.5%和余量的水组成；（6）将步骤(5)得到的冬虫夏草菌丝体固体发酵物在40～60℃的温度下烘干，粉碎，再加入10～50倍体积的蒸馏水，通过80～90℃的热水回流提取1～3次，趁热抽滤，合并滤液，浓缩至滤液体积的30%～50%，得到冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物。