发明名称 | 一种多重基因表达的分析方法 | ||
摘要 | 一种多重基因表达的分析方法,其特征在于:首先提取总RNA,利用各个基因相对应的嵌合引物,反转录获得各个基因的cDNA混合物,所述嵌合引物由含特定酶切位点的通用引物和各基因特异引物组成;然后利用包括所述含有特定酶切位点的通用引物进行PCR扩增得到各个基因表达标签的PCR产物;通过包括酶切、连接将代表各个基因的表达标签串联到一起,再将串联子克隆到载体上进行测序、分析;所述嵌合引物中通用引物的特定酶切位点与PCR扩增出的各基因表达标签的酶切位点不相重合。本发明多重基因表达的分析方法操作简便,成本低廉,适用范围广,可同时对至少20个基因进行表达分析。本发明方法的建立将为多基因的表达分析提供了有力工具。 | ||
申请公布号 | CN101921846B | 申请公布日期 | 2012.11.14 |
申请号 | CN201010232000.6 | 申请日期 | 2010.07.20 |
申请人 | 重庆大学 | 发明人 | 夏玉先;金凯;郑小莉 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人 | 周韶红 |
主权项 | 一种多重基因表达的分析方法,其特征在于:首先提取总RNA,利用各个基因相对应的嵌合引物,反转录获得各个基因的cDNA混合物,所述嵌合引物由含特定酶切位点的通用引物和各基因特异引物组成;然后利用包括所述含有特定酶切位点的通用引物进行PCR扩增得到各个基因表达标签的PCR产物;通过包括酶切、连接将代表各个基因的表达标签串联到一起,再将串联子克隆到载体上进行测序、分析;所述嵌合引物中通用引物的特定酶切位点与PCR扩增出的各基因表达标签的酶切位点不相重合;所述嵌合引物的5'端为含特定酶切位点的通用引物,所述嵌合引物的3'端为各基因特异引物。 | ||
地址 | 400044 重庆市沙坪坝区沙正街174号 |