发明名称 一种多重基因表达的分析方法
摘要 一种多重基因表达的分析方法,其特征在于:首先提取总RNA,利用各个基因相对应的嵌合引物,反转录获得各个基因的cDNA混合物,所述嵌合引物由含特定酶切位点的通用引物和各基因特异引物组成;然后利用包括所述含有特定酶切位点的通用引物进行PCR扩增得到各个基因表达标签的PCR产物;通过包括酶切、连接将代表各个基因的表达标签串联到一起,再将串联子克隆到载体上进行测序、分析;所述嵌合引物中通用引物的特定酶切位点与PCR扩增出的各基因表达标签的酶切位点不相重合。本发明多重基因表达的分析方法操作简便,成本低廉,适用范围广,可同时对至少20个基因进行表达分析。本发明方法的建立将为多基因的表达分析提供了有力工具。
申请公布号 CN101921846B 申请公布日期 2012.11.14
申请号 CN201010232000.6 申请日期 2010.07.20
申请人 重庆大学 发明人 夏玉先;金凯;郑小莉
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 代理人 周韶红
主权项 一种多重基因表达的分析方法,其特征在于:首先提取总RNA,利用各个基因相对应的嵌合引物,反转录获得各个基因的cDNA混合物,所述嵌合引物由含特定酶切位点的通用引物和各基因特异引物组成;然后利用包括所述含有特定酶切位点的通用引物进行PCR扩增得到各个基因表达标签的PCR产物;通过包括酶切、连接将代表各个基因的表达标签串联到一起,再将串联子克隆到载体上进行测序、分析;所述嵌合引物中通用引物的特定酶切位点与PCR扩增出的各基因表达标签的酶切位点不相重合;所述嵌合引物的5'端为含特定酶切位点的通用引物,所述嵌合引物的3'端为各基因特异引物。
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