将核酸进行测序之组合物与方法

摘要

实施例系关于将核酸进行测序的方法。实施例包括核苷酸类似物与包括校对活性之一核酸聚合酶酶或酶复合物的用途。核苷酸类似物可变成被并入一复制之股并且诱发聚合酶的校对活性，因此延长了与核苷酸并入相关之讯号的持续期间，产生更显著的测序结果并增加核酸测序的正确性。

主权项

一种测定一目标核酸序列之核苷酸序列的方法，包括步骤：(a)提供一反应复合物，包括，一模板核酸，其包括一目标核酸序列、一引物核酸，其包括与该模板核酸之一区域互补的一序列，与一聚合酶酶或一酶复合物，其包括5’至3’聚合活性与3’至5’外核酸酶活性；(b)使该反应复合物与复数个核苷酸类似物接触，其中该复数个之一个别的核苷酸类似物包括至少一碱基配对部分与至少一标记部分，该标记部分包括一光可侦测标记，其为指出该碱基配对部分的身份；(c)藉由该酶或酶复合物之5’至3’聚合活性，使该酶或酶复合物得以将一核苷酸类似物以一模板依赖方式并入一新生股，藉此将该标记部分结合至该新生股；(d)侦测该经并入之核苷酸类似物的该光可侦测标记；(e)藉由该酶或酶复合物之3’至5’外核酸酶活性，使该酶或酶复合物得以从该新生股移除该经并入之核苷酸类似物的该标记部分；以及(f)重复步骤(c)‑(e)以测定该目标核酸序列的序列。