| 摘要 |
Procedimiento para la generación de una partícula de un vector adenovírico, que comprende las etapas:a) generación de una partícula de un vector adenovírico en líneas celulares de empaquetamiento quecomprenden proteínas de la cápside, comprendiendo dichas proteínas de la cápside un sitio de fijación parala modificación específica de la partícula del vector adenovírico, comprendiendo dicho sitio de fijación almenos un residuo de cisteína que está ubicado en un dominio expuesto al disolvente de dicha proteína de lacápside;b) lisado de las células de empaquetamiento y la subsiguiente purificación de dichas partículas de vectoresadenovíricos en tampones con un pH desde 5,0 hasta 9,0 y exentos de cationes metálicos divalentes, en elque dicho tampón es(i) un tampón con poco oxígeno o sin oxígeno en una atmósfera de Ar, He, N2 o CO2, o(ii) un tampón con poco oxígeno o sin oxígeno complementado con reactivos reductores en una atmósferade Ar, He, N2 o CO2;c) poner en contacto los compañeros de acoplamiento con dichas partículas de vectores adenovíricos yrealizar una reacción de acoplamiento de los compañeros de acoplamiento a los residuos de cisteína a travésde enlaces tioéter, disulfuro o tioéster mediante la adición de reactivos alquilantes que comprenden gruposmaleimida, grupos ditiopiridilo o grupos yodoacetilo en un tampón con un pH desde 5,0 hasta 9,0 y exento decationes metálicos divalentes, en el que dicho tampón es(i) un tampón que comprende reactivos reductores, o(ii) un tampón con poco oxígeno o sin oxígeno complementado con reactivos reductores en una atmósferade Ar, He, N2 o CO2.
|
