食品和饮料中大蒜成分快速检测试剂盒的制备和检测方法

摘要

本发明属于食品和饮料中植物源性成分的定性检测技术，具体地说是用实时荧光PCR技术检测食品和饮料中大蒜成分的试剂盒及方法。试剂盒包括2×PCR Master Mix、上游引物、下游引物、Taqman探针；其中2×PCR Master Mix中含有Taq DNA聚合酶、反应缓冲液、氯化镁、dNTP，上游引物序列为5′-GGAAATGCTGCGAACTATGTGA-3′、下游引物序列为5′-TTGATTGGGCTGTAATGAGGC-3′、TaqMan探针序列为5′-FAM-TGGCAAGGAGACCTTCTGGGTTGTTAGG-TRAMA-3′；大蒜成分的快速检测方法包括食品和饮料DNA的提取、大蒜成分的实时荧光PCR扩增和结果判定。其优点是快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。

主权项

一种大蒜成分快速检测试剂盒，其特征在于其中的试剂包括(1)‑(4)：(1)2×PCR Master Mix包括0.05u/μL Taq DNA聚合酶，反应缓冲液，4mmol/L氯化镁，0.4mmol/L dNTP(dATP，dCTP，dGTP，dTTP)；其中反应缓冲液含有20mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷‑盐酸、100mmol/L氯化钾和2％曲拉通X‑100；(2)上游引物：10μmol/L，序列为：5′‑GGAAATGCTGCGAACTATGTGA‑3′；(3)下游引物：10μmol/L，序列为：5′‑TTGATTGGGCTGTAATGAGGC‑3′；(4)Taqman探针：10μmol/L，序列为：5′‑TGGCAAGGAGACCTTCTGGGTTGTTAGG‑3′，其5′端标记FAM报告荧光集团，3′端标记TAMRA淬灭荧光集团。