发明名称 |
水产品中主要病原菌的多重荧光定量PCR检测方法 |
摘要 |
一种水产品中主要病原菌的多重荧光定量PCR检测方法,其特征在于包括①取待测样品在增菌液中进行增菌培养4~8小时;②培养后的样品采用煮沸法抽提基因组DNA;③利用特异性的引物与TaqMan探针进行多重荧光定量PCR检测;④根据检测后的特异性S扩增曲线和阈值(Ct value)进行结果判断。与现有技术相比,本发明的优点在于:可以实现一管多检的实际需要,为副溶血弧菌、霍乱弧菌和单增李斯特菌的快速、灵敏、特异检出提供重大技术保障。 |
申请公布号 |
CN102121051B |
申请公布日期 |
2012.11.07 |
申请号 |
CN201010039615.7 |
申请日期 |
2010.01.07 |
申请人 |
中华人民共和国舟山出入境检验检疫局 |
发明人 |
周向阳;王淑娜;沈飚;胡兴娟;贝文联;朱应伟;徐君辉;周秀锦;邵宏宏 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;C12R1/63(2006.01)N;C12R1/01(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
宁波诚源专利事务所有限公司 33102 |
代理人 |
袁忠卫;景丰强 |
主权项 |
1.一种水产品中主要病原菌的非诊断目的的多重荧光定量PCR检测方法,其特征在于包括①取待测样品在增菌液中进行增菌培养4~8小时;②培养后的样品采用煮沸法抽提基因组DNA;③利用特异性的引物与TaqMan探针进行多重荧光定量PCR检测;④根据检测后的特异性S扩增曲线和循环值进行结果判断,其中步骤③中的特异性的引物与TaqMan探针如下:<img file="FSB00000884093100011.GIF" wi="1763" he="760" />所述的主要病原菌为副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus)、霍乱弧菌(V.cholera)或单增李斯特菌(L.monocytohenes)。 |
地址 |
316000 浙江省舟山市定海区环城南路505号 |