用于检测微生物的方法及试剂盒

摘要

根据如下步骤，通过流式细胞术检测试样中微生物的活细胞、受损细胞、VNC细胞和死细胞：a)用具有分解试样中除微生物细胞之外的其他细胞、蛋白胶粒或脂质的活性的酶处理试样的步骤，b)用拓扑异构酶抑制剂和/或DNA促旋酶抑制剂处理试样的步骤，c)用核染色剂处理步骤a)和b)中处理的试样的步骤，和d)通过流式细胞术检测用核染色剂处理的试样中微生物的步骤。

主权项

一种制备测量用样品的方法，所述的测量用样品用于通过流式细胞术检测试样中微生物的活细胞、受损细胞和死细胞，该方法包括下列步骤：a)用具有分解试样中除微生物细胞之外的其他细胞、蛋白胶粒或脂质的活性的酶处理试样的步骤，和b)用拓扑异构酶抑制剂和/或DNA促旋酶抑制剂处理试样的步骤，所述拓扑异构酶抑制剂选自单叠氮乙锭、安吖啶、喜树碱、多柔比星、椭圆玫瑰树碱、足叶乙苷、米托蒽醌、saintopin、托泊替康和CP‑115，953，所述DNA促旋酶抑制剂选自环丙沙星、氧氟沙星、依诺沙星、培氟沙星、氟罗沙星、诺氟沙星、萘啶酸、奥索利酸和吡咯米酸，其中当所述拓扑异构酶抑制剂为单叠氮乙锭时，对添加单叠氮乙锭的试样进行可见光照射；c)用核染色剂处理在步骤a)和b)中已经处理过的试样，其中核染色剂包含能穿透活细胞、受损细胞和死细胞的细胞壁的第一染色剂，和与第一染色剂相比，相对于活细胞和受损细胞更容易穿透死细胞的细胞壁的第二染色剂。