血清中胆固醇酯的两步酶测定方法

摘要

本发明公开了一种血清中胆固醇酯的两步酶测定方法，属于利用可见光，通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：试剂II中仅有胆固醇酯水解酶有效组分，双色原物质及其它有效组分同在试剂I中；其测定方法为：血清先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中游离胆固醇与试剂I反应生成醌亚胺，加入试剂II后于37℃温浴4～7分钟，胆固醇酯水解后生成胆固醇，经反应生成红色的醌亚胺。仪器在500nm～520nm波长处检测，以试剂I反应产生的醌亚胺为空白，由试剂II反应产生的醌亚胺可测出胆固醇酯的含量。本发明检测时不受内源性游离胆固醇影响，其使用方法和范围与原有两步酶法相同，是一种快捷、准确性更高的胆固醇酯检测方法。

主权项

一种血清中胆固醇酯的两步酶测定方法，其特征在于试剂I中含有4‑氨基安替比林和苯酚衍生物的双色原物质、胆酸钠、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、胆固醇氧化酶、表面活性剂及适量防腐剂；试剂II内含有胆固醇酯水解酶及适量防腐剂；其测定方法为：待测血清样品先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中游离胆固醇与试剂I反应生成醌亚胺，加入试剂II后于37℃温浴4～7分钟，胆固醇酯水解后产生胆固醇，经反应也生成醌亚胺；仪器在500nm～520nm波长处检测，以试剂I反应产生的醌亚胺为空白，从试剂II反应产生的醌亚胺计算出胆固醇酯的含量，计算公式为：ODCHE＝OD2‑OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]胆固醇酯浓度＝F×ODCHE其中ODCHE是胆固醇酯产生的吸光度，OD1是样品加入试剂I反应后测得的吸光度，OD2是样品加入试剂II反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，R1V1是试剂I的体积，R2V2是试剂II的体积，F是校正因数。