食品及加工品中萝卜成分检测试剂盒的制备和检测方法

摘要

本发明属于食品及其加工品的植物源成分——萝卜源性成分的快速筛查与检测的技术和试剂盒，具体是使用实时荧光PCR技术检测食品中萝卜的物种特异性基因orfB的物种特异性片段。本发明针对orfB基因的保守序列，设计特异性引物和探针，采用实时荧光PCR技术，快速、灵敏、特异地检测orfB基因，从而筛选产品中是否含萝卜源成分。该快速筛查试剂盒和检测技术用于检测混合样品中可能混有的萝卜成分，可以对可疑掺假或掺杂的含萝卜的样品进行核酸扩增反应。该方法快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。

主权项

快速检测萝卜源性成分的试剂盒包括PCR扩增反应液、阳性对照DNA两种特征性部分；反应预混液Real time Mix 10μL、10μmol/L上游引物0.5μL、10μmol/L下游引物0.5μL、10μmol/L探针1μL和模板成分2μl，加ddH2O(灭菌双蒸水)补足至25μl；上下游引物及探针序列：上游引物5’‑TCACCTGGGCATTCTTTC‑3’；下游引物5’‑CTGACTTCGTTCGTTAGAAG‑3’；TaqMan探针5’‑FAM‑TCAATTACCGAGACCTGGACATACAA‑TAMRA‑3’。阳性对照DNA为含有萝卜源性成分的DNA提取液。