用于制备产生期望的多肽的抗体生产细胞的方法

摘要

本发明的目标是提供将编码期望的氨基酸序列的DNA导入到抗体生产细胞的包含编码抗体可变区的DNA的区域中的方法。本发明人研发了用于将编码期望的氨基酸序列的DNA高效地导入DT40-SW的抗体可变区基因座的方法，DT40-SW是DT40鸡B细胞系的突变株，具有自发导入突变的能力。这允许诱变所导入的DNA，以修饰多肽使其具有更好的功能。特别是，本发明人揭示了DT40细胞系的抗体H链可变区基因座的核苷酸序列。基于该发现，本发明人成功地构建了打靶载体，所述打靶载体允许高效地利用编码期望的多肽的基因取代DT40细胞系的抗体H链可变区基因座。

主权项

一种将DNA构建体与抗体生产细胞的包含编码抗体可变区的DNA的区域同源重组的方法，包括将包含DNA构建体的打靶载体导入抗体生产细胞中的步骤，所述DNA构建体包含：(1)在所述细胞中执行功能的启动子DNA；(2)编码期望的氨基酸序列的DNA；和(3)抑制包含所述期望的氨基酸序列的多肽的产生，并能够从该DNA构建体中被去除的DNA。