发明名称 肺炎支原体耐药菌株的PCR-SNP检测方法
摘要 本发明根据已知的Mp23S rRNA中的耐药突变基因位点设计3条引物对其进行特异性扩增,为增加引物的特异性,人为在特异性引物的3′端引入一个错配碱基且3′端末端落在突变位点上;利用上述引物及其它PCR组份构建PCR反应体系;提取待测样本DNA,加入上述PCR反应体系并进行扩增,将上述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,判定是否发生耐药基因突变。
申请公布号 CN102747166A 申请公布日期 2012.10.24
申请号 CN201210262158.7 申请日期 2012.07.26
申请人 首都儿科研究所 发明人 孙红妹;李少丽;薛冠华;赵汉青;冯燕玲
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12R1/35(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京中伟智信专利商标代理事务所 11325 代理人 张岱
主权项 一种肺炎支原体耐药菌株的PCR‑SNP检测方法,其特征在于具体包括以下步骤:(1)根据已知的Mp23S rRNA中的耐药突变基因位点设计1条上游引物、1条下游引物和1条特异性引物对其进行特异性扩增,特异性引物是人为在引物的3′端引入一个错配碱基且3′端末端落在突变位点;(2)提取待测样本DNA;(3)利用上述3条引物、样本DNA及其它PCR组份构建PCR反应体系并进行扩增;(4)对上述PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,判定是否发生耐药基因突变。
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