鸡FSHR基因5′调控区两个突变位点的分子标记方法及其在鸡育种中的应用

摘要

本发明涉及分子遗传学领域，具体涉及了一种鸡FSHR基因5′调控区突变位点的分子标记方法及其育种中的应用，发明人发现鸡FSHR 5′调控区-237和-868位点进行单个位点标记分析时，两位点均未发现与性状相关，但用两位点单倍型构建双倍型进行多重比较时，结果发现TTG+G-型对应较小的开产日龄(123d)，TTG+G+型对应较大的开产日龄(134d)，两者差异显著(P＝0.016)，可见检测这两个与产蛋性状相关联的分子标记，不仅方法简便快速，而且不受环境影响，并可实现早期选种。

主权项

鸡FSHR基因5′调控区两个突变位点的分子标记方法在文昌鸡和新杨褐鸡育种中的应用方法，其特征在于：所述的具体标记方法为：采用标记引物P‑868，包括P‑868F，其序列如Seq ID No：1所示；P‑868R，其序列如Seq ID No：2所示；扩增鸡育种材料的基因组DNA，PCR扩增产物得到大小相差200bp的两个片段分别为1119bp的片段和919bp的片段，其序列分别如Seq ID No：3和Seq ID No：4所示，PCR产物在1.2％的琼脂糖凝胶电泳检测直接分出三种带型，200bp插入的记为G+G+型，200bp缺失的记为G‑G‑型，杂合子记为G+G‑型；采用标记引物P‑237，包括P‑237F，其序列如Seq ID No：5所示；P‑237R，其序列如Seq ID No：6所示；扩增鸡育种材料的基因组DNA，得到371bp的PCR扩增产物，其序列如Seq ID No：7所示，其中包含Ssp I限制性内切酶的识别序列“AAT/ATT”，当237“T”突变为“A”即“AAT/AAT”类型记做“AA”，扩增片段Ssp I内切酶切不开；“T”不发生突变类型记做“TT”，可以被Ssp I内切酶切作235bp和136bp的两条短片段；PCR产物被Ssp I限制性内切酶消化后用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测，即得到AA、TT、AT三种带型；在文昌鸡和新杨褐鸡产蛋数低或开产较晚的群体中，选择两位点单倍型组合为TTG+G‑基因型的个体留种，用于提高该群体的产蛋数及适当提早开产日龄。