发明名称 一种视网膜祖细胞培养方法及其培养基
摘要 本发明涉及生物技术领域,公开了一种视网膜祖细胞培养方法及视网膜祖细胞培养基。本发明所述细胞培养方法使贴壁或悬浮细胞生长在有一定三维空间结构的细胞外基质中,有效提高细胞的生长速率,防止细胞出现老化或分化,且不改变细胞的基因表达,确保了高质量、高密度的细胞繁殖,突破了传统培养方法细胞产量小、质量差等局限性,具有广泛的应用前景。
申请公布号 CN102747029A 申请公布日期 2012.10.24
申请号 CN201210268933.X 申请日期 2012.07.30
申请人 何伟 发明人 王卓实;张明琦;徐玲
分类号 C12N5/071(2010.01)I;C12N5/0797(2010.01)I 主分类号 C12N5/071(2010.01)I
代理机构 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人 冯琼
主权项 一种细胞培养方法,包含以下步骤:步骤1:取海藻酸钠粉末与溶剂混合,混合均匀加热制成海藻酸钠凝胶,灭菌备用;步骤2:收集成球培养的细胞,离心取沉淀,用培养基混匀细胞,种植在铺有海藻酸钠凝胶的细胞培养装置中进行培养;所述培养基配方为DMEM/F12培养液,添加终浓度为1:100的N‑2添加物,终浓度为10‑20ng/ml的表皮生长因子EGF,终浓度为10‑20ng/ml碱性生长因子bFGF,终浓度为10‑20ng/ml的三碘甲状腺氨酸T3、终浓度为10‑20ng/ml的神经营养素NT4、终浓度为10‑20ng/ml神经生长因子NGF、终浓度为10‑20ng/ml神经营养物质NF3以及终浓度2mmol/l L‑谷氨酰胺制成。
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