加强表达转运蛋白LysE提高钝齿棒杆菌L-精氨酸的产量

摘要

L-精氨酸从胞内分泌到胞外依靠的是转运蛋白LysE。本发明以首次以钝齿棒杆菌为研究菌株，构建了携带自身lysE基因的穿梭表达质粒pJC-tac-lysE并电转入钝齿棒杆菌中，获得加强lysE基因表达的重组钝齿棒杆菌。并对原始菌及重组菌进行平板显色定性检测和基本培养基培养实验考查L-精氨酸转运情况，验证了L-精氨酸转运蛋白LysE在钝齿棒杆菌中的过量表达，说明增强LysE的表达能够一定程度上降低胞内L-精氨酸的浓度提高L-精氨酸的产量。并对原始菌和重组进行250mL摇瓶发酵实验，结果表明，重组菌L-精氨酸产量提高了约12％，产率最大时提高了11.1％，且发酵周期有所缩短。

主权项

一种加强了lysE基因表达的重组钝齿棒杆菌pJC‑tac‑lysE/C.crenatum，其特征在于：将精氨酸转运蛋白编码基因lysE构建成为重组穿梭表达质粒pJC‑tac‑lysE并克隆至保藏编号为CCTCC NO：M208133的钝齿棒杆菌中从而提高了钝齿棒杆菌向胞外分泌精氨酸的能力，并且lysE基因是来源于保藏编号为CCTCC NO：M208133的钝齿棒杆菌。