主权项 |
一种姜黄素壳聚糖‑硬脂酸嫁接物胶束的制备方法,其特征在于它的步骤如下:(1)低分子量壳聚糖的合成取市售分子量为450kDa的脱乙酰度为90%的壳聚糖60g,加入到2000mL 重量百分比浓度为1.2%的盐酸水溶液中,55℃条件下搅拌2小时,然后加入壳聚糖酶4g,在55℃条件下行酶解反应,用布氏漏斗过滤,80℃下搅拌半小时后,加入0.5g活性炭,稀释,过滤,用0.45μm的微孔滤膜处理滤液,喷雾干燥得到壳聚糖,测得壳聚糖的重均分子量为18kDa;(2)壳聚糖硬脂酸接枝物的合成取0.8g 壳聚糖, 加40mL蒸馏水搅拌溶解后, 加入碳二亚胺0.65g, 搅拌溶解,将0.1g的硬脂酸溶于20 mL乙醇溶液中,将上述两种溶液混合, 在400rpm磁力搅拌条件下, 80℃恒温反应4小时, 之后维持常温,继续搅拌8小时至反应液澄清,将终反应液置透析袋, 蒸馏水透析72小时,透析液冷冻干燥, 得壳寡糖‑硬脂酸接枝物;采用三硝基苯磺酸法测定壳寡糖‑硬脂酸接枝物的氨基取代度,取1~8mg的壳寡糖分别溶于2mL蒸馏水,加入重量百分比浓度为4% 的碳酸氢钠2ml和重量百分比浓度为0.1%的三硝基苯磺酸2ml, 37℃放置2小时,加人2mol/L盐酸2ml,摇匀,344nm 测定吸光度, 制备壳寡糖标准曲线;取壳寡糖‑硬脂酸接枝物, 按上述方法操作,对照标准曲线计算壳寡糖‑硬脂酸接枝物氨基取代度;(3)姜黄素壳聚糖硬脂酸嫁接物胶束的制备称取氨基取代度为5~6%的壳寡糖硬脂酸接枝物20mg溶于10mL纯水,以0.1N HCl 调节pH至5.0,然后将溶液在常温超声30次,随后加入以DMSO溶解的2mg/mL姜黄素1mL,再在4°C振荡过夜,将上清液反复透析24小时后离心10min,收集上清,得到姜黄素壳聚糖‑硬脂酸嫁接物胶束。 |