从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法，以新鲜牛乳为处理对象，经离心脱脂后形成脱脂乳；加入酸调节pH，静置一定时间后离心除去酪蛋白；调节溶液pH至酸性，并加入盐后静置一定时间，离心收集上清液；上清液调节pH，加入钠盐，静置后离心收集沉淀；沉淀冲洗后溶于PBS缓冲液；溶液经超滤除去盐分，冻干；采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别β-乳球蛋白，以反向色谱定量纯度。采用本发明的方法能从新鲜牛乳中，通过酸沉淀和盐析的方法分离出β-乳球蛋白，结合超滤除盐，能得到高纯度的β-乳球蛋白。本方法提高了β-乳球蛋白分离效率，为β-乳球蛋白其他方面研究及应用提供了优质的原材料。

主权项

从原料乳中分离β‑乳球蛋白的方法，其特征是包括如下步骤：1）、将新鲜牛乳于3~5℃经离心和脱脂纱布过滤处理，从而除去乳脂肪，得首次滤液；2）、首次滤液调节pH至4.5~4.7，室温下静置20~40min；得处理后首次滤液；3）、将处理后首次滤液于3~5℃经离心和脱脂纱布过滤处理，所得的滤液重复上述3~5℃下的离心和脱脂纱布过滤处理，得二次滤液；4）、二次滤液调节pH至1.9~2.1，得处理后二次滤液；5）、先按照每1L处理后二次滤液添加65~75g氯化钠的用量比在二次滤液中加入氯化钠；然后再调节pH至1.9~2.1，接着室温下静置15~25min；6）、将步骤5）所得物于3~5℃下经离心和脱脂纱布过滤处理，收集滤液； 7）、先按照每1L滤液添加220~240g氯化钠的用量比在滤液中加入氯化钠；然后再调节pH至1.9~2.1，接着室温下静置15~25min；8）、将步骤7）的所得物于室温下离心，将所得的沉淀溶解于PBS缓冲液或蒸馏水中；9）、室温下，将步骤8）所得的溶液用截留分子量10000的滤膜进行超滤2~8小时；所得的截留液经冻干，得冻干β‑乳球蛋白粉末。