一种无外源诱导因子整合的猪可诱导多能干细胞及其构建方法

摘要

本发明涉及一种无外源诱导因子整合的猪可诱导多能干细胞及构建方法，包括步骤：A)采用CreER慢病毒载体感染猪可诱导多能细胞，经4OH-Tamoxifen诱导，CreER可以将带有loxp的外源因子Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc切除掉；B)通过FACS将不表达绿色荧光蛋白即无外源诱导因子整合的猪可诱导多能干细胞筛选出来。本发明获得的无外源诱导因子整合的猪可诱导多能干细胞可以应用于核移植克隆猪或者转基因猪，大大降低了外源诱导因子尤其是c-Myc的致癌风险。

主权项

一种无外源诱导因子整合的猪可诱导多能干细胞的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：a)采用CreER慢病毒载体感染猪可诱导多能干细胞；b)采用4OH‑Tamoxifen处理上一步骤得到的干细胞，所述CreER将外源因子切除掉；c)采用FACS筛选上一步骤得到的干细胞，得到所述无外源诱导因子整合的猪可诱导多能干细胞。