脂质体-壳聚糖复合基因载体的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种脂质体-壳聚糖复合基因载体的制备方法及应用，包括：将DOTAP稀释液缓慢滴加到同体积的DNA稀释液中，室温保温5-10min；再将分子量范围为50KDa-190Kda、脱乙酰度为75-85％的壳聚糖加入其中并混匀，室温保温20-30min，制得复合基因载体。该载体克服了阳离子脂质体DOTAP转染效率低的问题，具备了更高的转染效率。同时降低了细胞毒性，解决了阳离子脂质体细胞毒性偏大的问题。本发明的新型复合基因载体能缓释基因药物，增加基因的吸收和生物利用度。具备高效、安全、细胞相容性好、使用方便等优点，是一种新型的高效基因载体和转染试剂。

主权项

一种脂质体‑壳聚糖复合基因载体的制备方法，包括：①DOTAP的DMEM稀释液与DNA的DMEM稀释液混匀，室温保温5‑10min；②壳聚糖与步骤①的产物混匀，室温保温20‑30min，制得脂质体‑壳聚糖复合基因载体；步骤①所述DOTAP与DNA的质量比为3‑8：1,所述DOTAP的DMEM稀释液与DNA的DMEM稀释液的体积比为1:1;步骤②所述壳聚糖与步骤①所述DNA的质量比为0.2‑32：1,所述壳聚糖的分子量范围为50KDa‑190KDa，脱乙酰度为75‑85%。