一种纯化水飞蓟素的新方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种利用生物破壁、微波预处理得油，再经微波逆流提取以及大孔树脂纯化技术，得到高纯度水飞蓟素的方法。本发明优点：1、采用分步法脱脂，先预处理籽然后微波逆流，又采用等电点除蛋白，从而有利于水飞蓟素有效成分的充分溶出；2、微波提取将萃取时间降低至60-80min，提高了萃取速度和有效成分含量，节约药材及能源消耗。3、本发明采用了大孔树脂吸附技术，减少了溶剂的用量，大孔树脂再生方便迅速，成本大大降低。4、得到水飞蓟油和水飞蓟素两种产品。本方法先期对水飞蓟籽采用生物破壁，缩短了微波预处理时间，只需几分钟提取出籽油，两步微波提取缩短了提取时间，克服了常规提取时间长、提取物纯度低、提取物单一的缺点。

主权项

一种利用生物破壁、微波预处理得油，再经微波逆流提取以及大孔树脂纯化技术，得到高纯度水飞蓟素的方法。其步骤如下：(1)生物破壁：干燥水飞蓟籽浸湿，加入适量纤维素酶、半纤维素酶溶液，保温酶解60min，除掉包裹在籽皮外壳的纤维素、半纤维素、果胶片断和蛋白质膜，使被包裹的油脂细胞游离出来，提高油脂提取率。(2)预处理脱油：将水飞蓟籽粉碎过30‑60目筛，加入4‑6倍石油醚(沸程60‑90℃)溶液，进行微波预处理，微波功率在300～600W，频率4000～8000MHz，萃取时间300～400s，萃取温度为50～60℃，回收石油醚，得到水飞蓟油；(3)微波逆流提取：脱油后的水飞蓟籽粉用80‑85％的乙醇结合微波逆流提取，正向进料，反向进水，物料与水的流动为逆向连续动态流动。提取温度50～60℃，时间60‑80min，400～600W，频率5000～8000MHz，渣经出渣螺旋输送器强制推动至出渣口而排出，出渣螺旋同时对渣进行行挤压，将渣中残留液挤出，提高提取液得率，离心过滤，回收乙醇。(4)等电点沉淀：由于富含酸性氨基酸，蛋白质等电点主要分布在中性偏酸范围内，用盐酸调节PH至6‑6.5，析出蛋白质沉淀，分离蛋白质，再用NaO调节PH值在9‑10之间；(5)大孔树脂吸附：将水飞蓟碱溶液上经过预处理的大孔树脂吸附，使吸附物单，树脂型号为S‑8、AB‑8、DA‑201、NKA‑9树脂，树脂柱的高径比为8∶1‑15∶1；(6)酸水洗脱：在常温常压下，以0.5‑1BV/h流速，用PH为2的磷酸溶液洗脱树脂，洗脱体积为1‑6BV；(7)乙醇洗脱：在常温常压下，以2‑4BV/h流速，用70％‑95％的乙醇水溶液洗脱树脂，洗脱体积为3‑1BV；(8)减压干燥：收集乙醇洗脱液，碱压浓缩，回收乙醇，真空干燥，微粉化，得到水飞蓟素。