截短的细粒棘球蚴EG95蛋白重组毕赤酵母高密度发酵工艺

摘要

本发明公开一种截短的细粒棘球蚴EG95蛋白的tEG95重组毕赤酵母高密度发酵方法。本发明所使用的重组酵母工程菌单克隆EG95-1菌株系发明人构建并鉴定，并于2012年02月16日保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No5764。本发明的发酵方法是将发酵工作种子液转接于BSM液体培养基，调整培养基pH到5.5开始增菌，增菌过程补加含甘油和PTM1的水溶液，再在培养体系中分阶段加入含PTM1的甲醇溶液的溶液进行蛋白诱导表达。

主权项

截短的细粒棘球蚴EG95蛋白的tEG95重组毕赤酵母高密度发酵方法中发酵前的工作种子培养方法，其特征在于：挑取1个重组酵母工程菌EG95‑1的单克隆于YPD液体培养基中，培养至菌液OD600为5.0左右，得到一级种子培养液；再将上述培养液转接BMGY培养基，培养至菌液浓度OD600达到40.0左右，得到发酵工作种子液，上述培养过程均在28℃下进行，其中的重组酵母工程菌EG95‑1单克隆菌株于2012年02月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No5764。