发明名称 |
一种基于PCR的甜瓜杂交种种子遗传纯度快速鉴定方法 |
摘要 |
本发明公开一种基于PCR的甜瓜杂交种种子遗传纯度快速鉴定方法。该鉴定方法为:分别利用所筛选的SRAP引物组合NAUSRem6/NAUSRfc8和/或RAPD引物NAURP401,以‘海蜜2号’甜瓜亲本与F1单株基因组DNA为模板进行PCR扩增,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物;只有同时具有亲本特异条带的单株才为真正的杂交种,缺少任一亲本条带均为假杂交种。本发明的检测方法克服了常规田间纯度检测操作复杂、准确度低等缺点,不仅快速、简便,成本低,稳定可靠,且不受生长阶段与环境影响,可以成为甜瓜种子遗传纯度鉴定的重要检测方法之一。 |
申请公布号 |
CN102732621A |
申请公布日期 |
2012.10.17 |
申请号 |
CN201210192805.1 |
申请日期 |
2012.06.12 |
申请人 |
南京农业大学 |
发明人 |
柳李旺;陈志成;龚义勤;徐良;包卫红 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
南京天华专利代理有限责任公司 32218 |
代理人 |
徐冬涛;傅婷婷 |
主权项 |
甜瓜杂交种‘海蜜2号’种子遗传纯度的鉴定方法,其特征在于:分别利用SRAP引物组合NAUSRem6/NAUSRfc8和/或RAPD引物NAURP401,以‘海蜜2号’甜瓜亲本与F1单株基因组DNA为模板进行PCR扩增,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物;只有同时具有亲本特异条带的单株才为真正的杂交种,缺少任一亲本条带均为假杂交种;所述的SRAP引物组合NAUSRem6/NAUSRfc8的正向引物NAUSRem6序列为SEQ ID NO.1,反向引物NAUSRfc8序列为SEQ ID NO.2,该引物组合能够扩增出大小为350bp的母本特异条带,370bp的父本特异条带;所述的RAPD引物NAURP401序列为SEQ ID NO.3,产生大小为1270bp的母本特异条带,960bp的父本特异条带。 |
地址 |
210095 江苏省南京市玄武区卫岗1号 |