鼠疫耶尔森菌检测用引物组、快速诊断试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开一种鼠疫耶尔森菌检测用引物组、快速诊断试剂盒和检测方法，该引物组由如下四条引物组成：外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP。本发明的试剂盒由上述引物组、Bst DNA聚合酶、样品预处理液、稳定液、反应液、显色液和阳性对照液组成，以上七种液体分别置于容器中。本发明的引物组和试剂盒均可高效高特异性地检测鼠疫耶尔森菌，它们均是基于环介导等温扩增技术，应用六个区段，四条引物，一个恒定温度，在不到1小时即可完成扩增反应，检测成本低、耗时短、产率高，特异性高，且阴阳性结果显色差异显著，验证率高，更加明显可靠。

主权项

一种快速诊断试剂盒，其特征在于该试剂盒是由引物组、Bst DNA聚合酶、样品预处理液、稳定液、反应液、显色液和阳性对照液组成，以上七种液体分别置于容器中，其中：所述引物组由如下四条引物组成：外引物F3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；外引物B3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；内引物FIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；内引物BIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；所述反应液的配方为：含有1.6～2mmol/L dNTP、20～25mmol/L Tris‑HCl、10～12.5mmol/L氯化钾、10～12.5mmol/L硫酸铵、8～10mmol/L硫酸镁、0.01～0.04mol/L TritonX‑100、0.8～1mol/L甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6～2mol/L和外引物F3/B3各0.2～0.25mol/L；所述样品预处理配方为：含有10～20mmol/L pH8.0的Tris‑HCl、1～2mmol/L EDTA和0.01～0.04mol/LTritonX‑100；所述阳性对照为鼠疫耶尔森菌基因组DNA。