一种艾塞那肽药代动力学的测试方法

摘要

一种艾塞那肽药代动力学的测试方法，属于分析技术领域。本发明将人血浆样本经固相萃取柱萃取浓缩后稀释至合适的浓度，采用高效液相色谱-紫外检测器对艾塞那肽进行检测；用质量浓度85％乙腈-去离子水配制成含艾塞那肽0.05mg/mL的溶液，计为W对照；0.5mL血浆样本经固相萃取冻干后的样本，加50μL质量浓度85％乙腈-去离子水溶解作为被测样本W样品；经HPLC测试对照品的色谱峰面积分别为S对照，被测样本的色谱峰面积为S样品，按外标法计算被测样本中艾塞那肽的含量为：W样品＝(S样品/S对照)W对照，血浆中艾塞那肽的含量为W样品×50/0.5×106pg/mL；本发明用液相色谱分析人血浆中艾塞那肽的含量，方法简便、可靠、为临床用药提供有效的实验数据。

主权项

1.一种艾塞那肽药代动力学的测试方法，其特征在于将人血浆样本经固相萃取柱萃取浓缩后稀释至合适的浓度，采用高效液相色谱-紫外检测器对艾塞那肽进行检测，步骤为：(1)血浆样本的提取：采用固相萃取装置VMF016GL，Sepax-uct的柱，先依次用1mL甲醇、1mL含质量浓度0.1％三氟乙酸的去离子水将柱子活化；吸取0.5mL血浆样本，以1～2mL/min的速度加入固相萃取柱，样本富集后用1mL含质量浓度0.1％三氟乙酸的去离子水淋洗，抽干；再用甲醇-含质量浓度0.1％三氟乙酸的去离子水溶液洗脱，甲醇：含质量浓度0.1％三氟乙酸的去离子水体积比75∶25，抽干；用氮气吹干有机溶剂，冷冻干燥，待测；(2)HPLC测试：色谱条件确定为：仪器：WATERS 600型高效液相色谱仪，WATERS 2487紫外检测器，色谱柱Sepax HP-C18，5μm，4.6×250mm；流动相：A：含质量浓度0.1％三氟乙酸的乙腈，B：含质量浓度0.1％三氟乙酸的去离子水；使用前流动相经0.45μm滤膜抽滤并脱气，流速：0.8mL/min；样品的进样体积：10μL；柱温：室温；检测波长：210nm；精密称取标准品艾塞那肽作对照，用质量浓度85％乙腈-去离子水配制成含艾塞那肽0.05mg/mL的溶液，计为W_对照；0.5mL血浆样本经步骤(1)提取冻干后的样本，加50μL质量浓度85％乙腈-去离子水溶解作为被测样本W_样品；经HPLC测试对照品的色谱峰面积分别为S_对照，被测样本的色谱峰面积为S_样品，按外标法计算被测样本中艾塞那肽的含量为：W_样品＝(S_样品/S_对照)W_对照，单位为mg/mL，血浆中艾塞那肽的含量为W_样品×50/0.5×10⁶pg/mL。