主权项 |
一种魔芋高效快速组培繁殖方法,其特征在于该方法包括以下步骤:1)培养基的制备:以MS培养基为基本培养基,附加6‑苄氨基嘌呤0.05~2.5mg/L、α‑萘乙酸0.6~2.0mg/L、聚乙烯吡咯烷酮0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L后制得pH值为5.8~6.0的愈伤组织诱导培养基,以MS培养基为基本培养基,附加6‑苄氨基嘌呤0.05~3.5mg/L、α‑萘乙酸0.1~1.5mg/L、聚乙烯吡咯烷酮0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L后制得pH值为5.8~6.0的芽分化诱导培养基,以1/2MS培养基为基本培养基,附加3‑吲哚丁酸0.02mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L后制得pH值为5.8~6.0的生根培养基;2)魔芋外植体的采集:采集健康无病无伤的魔芋球茎作为外植体;3)魔芋外植体的消毒:将采集的魔芋球茎外植体,用自来水冲洗干净后,放入质量百分浓度为1%洗衣粉水中冲洗5分钟,并搅拌;然后用清水冲洗干净后放到75%的酒精中浸泡1分钟,之后取出再浸入0.2%升汞水浸泡15分钟,并搅拌,最后用无菌水冲洗3次,每次2~3分钟;4)魔芋愈伤组织诱导:将步骤3)中消毒好的魔芋球茎外植体,切成0.4~1㎝见方的小块,接种到愈伤组织诱导培养基上培养,先暗培养14~16天后,再置于27℃±1℃、每天光照12~14h、光照强度1000~2000lx的条件下,诱导愈伤组织产生,愈伤组织诱导周期为30~35天;5)魔芋芽分化诱导:将步骤4)中的愈伤组织转接到芽分化诱导培养基上培养,魔芋芽分化诱导周期为60~70天,不定芽大量产生,魔芋组培种苗开始形成;6)魔芋组培种苗生根培养:将步骤5)中形成的魔芋组培种苗在生根培养基上培养,生根培养时间需要7~15天;7)组培种苗移栽:将步骤6)中生根的魔芋组培种苗开瓶炼苗3~4天后移栽于自然条件下的苗床或人工温室无土栽培苗床上;经过精心栽培、肥水管理、温光控制及病虫害防治,正常倒苗后收获魔芋原原种,获得的原原种平均重达10克以上。 |