产氢量提高的基因工程衣藻及其应用

摘要

本发明公开了产氢量提高的基因工程衣藻及其应用。本发明所提供的基因工程衣藻，是通过抑制出发衣藻中铁氧化还原蛋白-NADP还原酶编码基因的表达水平，得到的基因工程衣藻。经气相色谱测定，缺硫处理48小时该基因工程衣藻产氢量较野生型藻株提高6-10倍。这一突变藻株的获得为微藻光合制氢技术的产业化奠定了基础。

主权项

一种基因工程衣藻，是通过抑制出发衣藻中铁氧化还原蛋白‑NADP还原酶编码基因的表达水平，得到的基因工程衣藻；所述抑制所述铁氧化还原蛋白‑NADP还原酶编码基因的表达水平是通过RNA干扰实现的；所述RNA干扰是通过将双链RNA的编码DNA导入所述出发衣藻中实现的；其中，所述双链RNA的一条链的核苷酸序列是将序列表中序列1的碱基序列中的T替换为U得到的核糖核苷酸序列，另一条链与其反向互补；所述双链RNA的编码DNA是如下双链DNA片段：SEQ正向‑X‑SEQ反向；其中，SEQ正向的核苷酸序列是序列表中序列1的碱基序列；SEQ反向与所述SEQ正向反向互补；X是SEQ正向与SEQ反向之间的间隔序列，X与所述SEQ正向和SEQ反向均不互补；所述双链RNA的编码DNA是通过重组表达载体导入所述出发衣藻的；所述重组表达载体为将所述双链RNA的编码DNA插入表达载体Maa7/XIR的多克隆位点得到的重组表达载体；所述出发衣藻为莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)藻株CC‑400。