基于AAV载体的高通量miRNA活性检测方法及其应用

摘要

本发明具体涉及一种基于AAV(Adeno-associated virus)载体的高通量miRNA活性检测方法miRNA Asensor Array(miRNA sensor based AAV vector Array，基于AAV载体的、用于miRNA活性检测的生物传感器)及其在细胞miRNA活性谱检测、不同细胞特征miRNA活性谱检测和外界因素(如药物、转基因)对细胞miRNA活性谱的影响等方面的应用。miRNA Asensor Array由不携带miRNA靶序列的control Asensor和多种携带miRNA靶序列的miRNA Asensor按照一定顺序排列组成。Control Asensor和miRNA Asensor均包含Gluc(Gaussia luciferase)和Fluc(firefly luciferase)两个独立的表达单元，其中Gluc用于miRNA活性检测，Fluc用于计算miRNA Asensor的转导系数，校正不同miRNA Asensor之间的感染性差异。使用时，将待检测细胞加入到制备好的miRNA Asensor Array中，一段时间后检测Gluc表达情况并根据转导系数计算出细胞中miRNA活性谱。该方法为细胞miRNA活性谱的制作及其影响因素研究提供了新的选择。

主权项

一种基于AAV载体的、用于高通量地检测活细胞的miRNA活性的miRNA活性检测阵列的检测技术方法。