| 摘要 |
1. Способ селекции по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей представляющий интерес полипептид на искомом уровне, включающий: ! а) получение набора эукариотических клеток-хозяина, содержащих гетерологичную нуклеиновую кислоту, включающую по меньшей мере одну кассету (Cas-POI), содержащую хотя бы первый полинуклеотид (Pn-POI), кодирующий представляющий интерес полипептид, по меньшей мере один терминирующий кодон, расположенный по направлению экспрессии относительно первого полинуклеотида, а также второй полинуклеотид, расположенный по направлению экспрессии относительно терминирующего кодона, кодирующий иммуноглобулиновый трансмембранный якорный домен или его функциональный вариант; ! б) культивирование эукариотических клеток-хозяина с целью экспрессии представляющего интерес полипептида таким образом, чтобы по меньшей мере часть рассматриваемого полипептида экспрессировалась в виде гибридного полипептида, включающего иммуноглобулиновый трансмембранный якорный домен или его функциональный вариант, причем указанный гибридный полипептид представлен на клеточной поверхности; ! в) селекцию по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина по наличию или количеству гибридного полипептида, представленного на клеточной поверхности. ! 2. Способ получения представляющего интерес полипептида с высоким выходом, который включает: ! а) получение набора эукариотических клеток-хозяина, содержащих гетерологичную нуклеиновую кислоту, включающий по меньшей мере одну кассету (Cas-POI), содержащую хотя бы первый полинуклеотид (Pn-POI), кодирующий представляющий интерес полипептид, по мень |
