用于生产脂肪酶的方法、能产生所述脂肪酶的转化解脂耶氏酵母细胞以及它们的应用

摘要

用于生产解脂耶氏酵母耐酸重组体脂肪酶的方法，该方法利用的培养基除其使用的物质外不含任何动物来源的产物或未表征的混合物比如胰胨、蛋白胨或抗乳血清。可以生产过多量的脂肪酶Lip2的解脂耶氏酵母的重组菌株被称作YL-LIP2-6C，该菌株于2005年12月15日保藏在法国培养物和微生物国家保藏中心(C.N.C.M.)，保藏编号为I-3542，本文还涉及其应用。

主权项

一种用于生产重组体脂肪酶的方法，其包括：a)培养用载体转化的解脂耶氏酵母细胞的步骤，所述载体包含用于表达酵母耐酸脂肪酶的表达盒，所得到的解脂耶氏酵母细胞是名为YL‑LIP2‑6C的克隆，所述克隆于2005年12月15日保藏在法国培养物和微生物国家保藏中心(C.N.C.M.)，保藏编号为I‑3542；以及b)从培养液上清液中回收用所述YL‑LIP2‑6C细胞生产的所述重组体脂肪酶的步骤，该方法的特征在于，用于培养的步骤a)是在不含由动物来源的蛋白质材料或它们的酶消化产物所组成的动物来源的产物或未被表征的混合物的培养基中进行的；并且所述培养基包含：‑作为氮源的无机氮；‑碳源，其选自于碳水化合物来源的碳源、多元醇、以及脂类来源的碳源；以及‑无机盐和维生素；并且所述步骤a)包括：a1)在含有碳水化合物来源的碳源的培养基中预培养所述YL‑LIP2‑6C细胞；a2)发酵步骤，包括在含有碳水化合物来源的碳源的培养基中的细胞生长期，以及在含有脂肪酸作为唯一碳源的培养基中的脂肪酶生产期。