加速黄柄鹅膏菌丝体生长的优化培养方法

摘要

本发明涉及一种加速黄柄鹅膏（Amanitaflavipes）菌丝体生长的培养方法，属于大型真菌培养技术领域。其特征为：由未开伞的成熟子实体诱导菌丝体，通过培养基改良，提供简单、培养周期短、成本低，能促进菌丝快速生长的优化培养基。鹅膏属是特殊珍贵的大型经济真菌，其价值大应用范围广，在开发新特效药如抗肿瘤、抗菌抗病毒、镇静或麻醉药等领域具有潜在地应用前景，但至今因其资源珍稀、难以人工驯化、毒素的化学合成品无活性等问题尚难以开发应用。本发明以云南武定狮山采集的黄柄鹅膏为材料，征对其菌丝难以诱导、菌丝生长非常缓慢等制约培养的问题进行了创新性突破，为今后鹅膏菌丝规模化培养及人工驯化等提供了条件。

主权项

一种加速黄柄鹅膏（Amanita flavipes）菌丝体生长的培养方法，其特征为，采用成熟子实体室内诱导菌丝，征对菌丝体培养过程中菌丝体生长极其缓慢等问题，通过培养基改良，提供能促进菌丝快速生长的优化培养基，主要包括下列步骤：（1）材料的选择：野外采摘生长优良、无虫害、未开伞或未完全开伞、菌柄较粗壮、菌盖较肥厚的成熟子实体；（2）材料的消毒及处理：将子实体带回实验室，于超净台上用酒精棉球，轻擦菌盖表面及菌柄等部位，除去表面泥沙或土，将子实体从菌盖中部一分为四，用解剖刀取菌柄与菌盖交接处的内部组织块，切成约0.08～0.16cm2的小块；（3）菌丝体诱导：将以上切分的小组织块轻轻嵌入试管斜面诱导培养基表面，培养温度为21～22℃，暗培养14～18天，菌块周围开始萌发出极少白色菌丝，53～60天，组织块多处隆起，表面长出团状、稠密的绒毛状白色菌丝；（4）菌丝体均一性与扩大培养：将上面诱导出的菌丝体从试管中转接入培养皿( 诱导培养基)，在温度为21～22℃下，经过38～40天的暗培养，培养皿中形成直径2.5～3.0cm的圆形规则菌落，用直径1.0 cm的圆形打孔器取菌落边缘同一生长期的菌块进行扩大培养，每35～36天扩大培养一次；（5）培养基改良及优化：以诱导培养基为基础，对菌丝体的培养基进行了反复筛选，得到了优化的培养基，使用该培养基，22～25天，菌丝直径为7.5～8.5cm，菌丝基本长满培养皿。