重组链霉亲和素的制备工艺

摘要

本发明涉及重组蛋白制备领域，具体公开了一种重组链霉亲和素的制备工艺，利用基因工程的方法，人工合成表达重组链霉亲和素的重组基因，将该重组基因序列插入载体，转化宿主细胞，通过发酵，分离纯化等步骤获得重组链霉亲和素。本发明制备工艺表达的纯化的重组链霉亲和素可以达到500mg/L的最终纯蛋白产量，蛋白活性高，并且蛋白纯化工艺简单，成本低廉，便于工业化生产。

主权项

一种重组链霉亲和素的制备工艺，具体步骤如下：1)人工合成表达重组链霉亲和素的重组基因，所述重组基因的序列包括核心链霉亲和素基因序列以及位于核心链霉亲和素基因序列左右两侧的限制性酶切位点序列；2)重组质粒的构建：将步骤1）的重组基因插入载体，获得能够表达重组链霉亲和素的重组质粒；3)基因工程菌的制备：将步骤2）获得的重组质粒转化宿主细胞制备基因工程菌；4)外源基因的表达：基因工程菌发酵表达重组链霉亲和素；5)目的蛋白的分离纯化：裂解菌体，通过蛋白纯化步骤获得重组链霉亲和素。