固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法

摘要

本发明涉及动物产品药物残留的检测方法，尤其涉及一种固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法。固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法，该方法通过乙腈提取，正己烷脱脂，再用C18固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱法(LC-MS/MS)测定，同位素内标稀释内标法和外标法定量，回收率范围为21.1%～121%；相对标准偏差小于19.8%。可作为筛选方法应用于猪肉中磺胺类、硝基咪唑类、喹诺酮类、大环内酯类、林可酰胺类和吡喹酮共计54种药物残留的同时测定。本方法具有检测成本低，测定速度快等特点，所提及的前处理过程、涉及药物类别以及测定所用仪器可以与已有方法进行很好的互补。

主权项

1.固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：一、肉类样品中待测药物的提取液的制备①称取5g试样，精确到0.01g，置于50mL具塞离心管中，加入同位素内标溶液，同位素内标溶液为：磺胺类同位素内标8ng，硝基咪唑类同位素内标40ng，喹诺酮类同位素内标30ng；加入20mL乙腈，混匀，以3000r/min离心3min，上清液转移至另一50mL具塞离心管中；②残渣再加入15mL乙腈重复上述操作，合并乙腈提取液，以7000r/min离心5min，取乙腈上清液，加入15mL正己烷，混匀，4000r/min离心3min，弃去正己烷层，再加入15mL正己烷，重复上述操作，乙腈提取液过无水硫酸钠柱，在40℃以下水浴中减压浓缩至近干，加入4mL甲醇溶解残渣，待净化；二、提取液净化将上述溶液定量转移至C18固相萃取小柱中，控制流速1mL/min～2mL/min，同时接收甲醇溶液，再分批加入6mL甲醇进行洗脱，收集洗脱液，在40℃以下水浴中减压浓缩至近干，用2.0mL甲醇水溶液定容，混匀，溶液过0.22μm滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定；三、测定①标准工作液和样品溶液在设定的液相色谱-质谱/质谱条件下进样，以质量浓度X为横坐标，峰面积的比值Y为纵坐标，绘制5点标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中药物的响应值应在仪器检测的线性范围内；②在上述色谱条件下，判断样品中是否存在相应的被测物，需要满足如下条件：样品溶液中出现的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致，允许偏差小于±2.5%，该色谱峰所对应的药物在设定质谱定性离子的相对丰度与浓度相当的混合基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过设定的规定，则可确定含有该药物；所述的步骤三中设定的各类药物的母离子、子离子和碰撞能量等质谱参数如下：所述的步骤三中设定的液相色谱串联质谱的仪器条件参数如下：所述的54种药物残留的基本信息如下：