蜡梅属植物抑制乙酰胆碱酯酶活性部位的制备及其应用

摘要

本发明属于中药制药领域，涉及蜡梅属植物抑制乙酰胆碱酯酶活性部位的制备及其应用。蜡梅属植物活性部位制备方法为乙醇浸提，低极性溶剂萃取，酸溶碱沉氯仿萃取或碱溶酸沉、离心和乙酸乙酯萃取，所提取的活性部位包括3类物质，分别是：生物碱类、黄酮类和香豆素类。本发明所述的活性部位具有较强的抑制乙酰胆碱酯酶活性作用，在制备预防和治疗乙酰胆碱缺失导致的相关症状或疾病，尤其是防治老年性痴呆的药物中具有广泛的用途。

主权项

蜡梅叶活性部位在制备抑制乙酰胆碱酯酶活性药物中的应用，其特征在于所述的蜡梅叶活性部位为生物碱类物质或黄酮类物质或香豆素类物质；所述生物碱类物质制备步骤为：a.称取蜡梅叶为原料，晾干、粉碎，用体积百分浓度为50～80％的乙醇溶液提取3次，各次所用乙醇溶液的质量依次为蜡梅叶原料质量的10倍、8倍和8倍，每次提取8～12小时，将三次的提取液用纱布过滤后合并；b.将上述合并后的提取液在低于80℃的温度下，减压浓缩回收乙醇至无醇味，得乙醇提取物，将其30～60℃烘干成浸膏备用；c.称取蜡梅叶浸膏200～300克，用5～15％的醋酸水溶液将其分散后，用乙酸乙酯萃取，每次500mL，萃取5～15次，收集酸水相和乙酸乙酯相；d.将上述酸水相用碳酸钠碱化至溶液pH为8～10，得碱水相，碱水相用氯仿萃取，每次500mL，萃取5～10次，收集氯仿相；e.利用碘化铋钾显色法确定氯仿相为生物碱类活性物质；所述黄酮类物质制备步骤为：a.称取蜡梅叶为原料，晾干、粉碎，用体积百分浓度为50～80％的乙醇溶液提取3次，各次所用乙醇溶液的质量依次为蜡梅叶原料质量的10倍、8倍和8倍，每次提取8～12小时，将三次的提取液用纱布过滤后合并；b.将上述合并后的提取液在低于80℃的温度下，减压浓缩回收乙醇至无醇味，得乙醇提取物，将其30～60℃烘干成浸膏备用；c.称取蜡梅叶浸膏200～300克，用5～15％的醋酸水溶液将其分散后，用乙酸乙酯萃取，每次500mL，萃取5～15次，收集酸水相和乙酸乙酯相；d.将上述乙酸乙酯相用5～15％的碳酸钠水溶液萃取，每次500mL，萃取5～10次，收集碱水层；e.将收集的碱水层用盐酸酸化至溶液pH为5.0～6.0，酸化后有大量的沉淀析出，离心并收集沉淀；f.将收集的沉淀取出部分用少量的水溶解后，采用三氯化铝检测法确定沉淀物为黄酮类活性物质；所述香豆素类物质制备步骤为：a.称取蜡梅叶为原料，晾干、粉碎，用体积百分浓度为50～80％的乙醇溶液提取3次，各次所用乙醇溶液的质量依次为蜡梅叶原料质量的10倍、8倍和8倍，每次提取8～12小时，将三次的提取液用纱布过滤后合并；b.将上述合并后的提取液在低于80℃的温度下，减压浓缩回收乙醇至无醇味，得乙醇提取物，将其30～60℃烘干成浸膏备用；c.称取蜡梅叶浸膏200～300克，用5～15％的醋酸水溶液将其分散后，用乙酸乙酯萃取，每次500mL，萃取5～15次，收集酸水相和乙酸乙酯相；d.将上述乙酸乙酯相用5～15％的碳酸钠水溶液萃取，每次500mL，萃取5～10次，收集碱水层；e.将收集的碱水层用盐酸酸化至溶液pH为5.0～6.0，酸化后有大量的沉淀析出，离心收集上清，上清用乙酸乙酯萃取，每次500mL，萃取5～10次，收集乙酸乙酯相；f.将收集的乙酸乙酯相组合物采用氢氧化钾检识确定其为香豆素类活性物质。