木霉菌剂的制备方法

摘要

本发明公开了木霉菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）木霉菌种的种子培养；2）将步骤1）得到的木霉菌种子用无菌水稀释为木霉孢子悬浮液；3）将步骤2）得到的木霉孢子悬浮液进行液态发酵，得到木霉液态发酵液；4）将步骤3）得到的木霉液态发酵液置于去淀粉马铃薯渣固体培养基中进行固态培养。本发明的有益效果为：1、本发明提供的技术方案采用易得且廉价的去淀粉马铃薯残渣生产木霉菌剂，解决了成本高、配方复杂等问题，同时解决了马铃薯渣造成的环境污染、以及不能充分回收利用的问题；2、本发明提供的技术方案产生木霉分生孢子的数量可以高达3.2×1012cfu/g底物，产孢量是现有技术的100倍，提高了产出率、更大程度的节约了成本。

主权项

木霉菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）木霉菌种的种子培养：所述木霉菌种为长枝木霉；将木霉种子接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，培养温度为25‑30℃，光照条件为光照8‑16小时、黑暗8‑16小时交替，培养时间为4天；2）将步骤1）得到的木霉菌种子用无菌水稀释为木霉孢子悬浮液，稀释浓度为1×103cfu/ml‑1×108cfu/ml，稀释方法为血球计数板计数，并调节PH为4‑7；3）将步骤2）得到的木霉孢子悬浮液进行液态发酵，发酵培养基质为去淀粉马铃薯渣培养液，接种量为按体积比木霉孢子悬浮液：去淀粉马铃薯渣培养液为1:55‑1:70培养条件为25℃‑28℃，摇床培养140r/min‑160r/min，连续培养5‑7天，得到木霉液态发酵液；4）将步骤3）得到的木霉液态发酵液置于去淀粉马铃薯渣固体培养基中进行固态培养，所述去淀粉马铃薯渣固体培养基包括有去淀粉马铃薯渣和蓬松剂，按质量比去淀粉马铃薯渣：蓬松剂为5：1，按质量比固体培养基: 发酵液为1:1‑1:2，搅拌均匀，培养条件为25‑30℃，静态培养8‑10天，得到木霉菌剂，其中，产孢量为每克培养底物产出3.2×1012cfu单位木霉孢子。