一种细胞综合检测方法

摘要

本发明提供一种细胞综合检测方法，包括以下三个步骤：先对切片进行染色处理，使细胞核染上较深的颜色，细胞膜和细胞质染上较浅的颜色，保证在捕捉到的图像中，深色的细胞核和浅色的细胞质、细胞膜都能清解晰呈现；再检测细胞核以测定的DNA含量，并且测量细胞的形态学参数；最后，根据细胞的形态学特征参数、DNA含量给出检测报告。本发明由于采用了特殊的染色方法，在捕捉到的图像中，深色的细胞核清晰呈现的同时让细胞质和细胞膜染上较浅的颜色，通过显微镜观察，定量测定细胞核DNA的同时还能检测细胞的形态学特征用以定性分析，能提供关于一个细胞的大量信息，提高细胞检测及分类的准确性。

主权项

一种细胞综合检测方法，其特征在于包括以下步骤：第1步，对切片进行染色处理，使细胞核染上较深的颜色，细胞膜和细胞质染上较浅的颜色，保证在捕捉到的图像中，深色的细胞核和浅色的细胞质、细胞膜都能清解晰呈现；染色处理步骤如下：a.将制好的标本片自然干燥；b.将干燥的标本片置入无水乙醇液内固定30分钟后，直接放入B.S液中固定60分钟，取出后用蒸馏水洗涤二次，再放入5mol/L的盐酸内酸化60分钟，酸化温度在22℃～25℃，取出后用蒸馏水洗涤2次；c.将经上述处理过的标本片放入染色缸内，加满染色液染色67分钟，染色温度在22℃～25℃，倾出染液，用蒸馏水冲洗5～6次；d.用漂洗液洗涤三次，第一次1～2分钟，第二次1～2分钟，第三次1～2分钟，再用水洗涤2至3次；e.进入复染，放入95％乙醇液内浸泡2～3分钟；f.在EA50染液中染胞浆5～8分钟；g.放入95％乙醇内浸泡2～3分钟；h.在无水乙醇中浸泡两次每次2～3分钟；i.将干燥的脱水片放入二甲苯原液缸内透明30～60秒；j.将透明过的标本片用中性树胶加盖玻片封固；其中，染色处理中使用的试剂包括B.S液、染色液、漂洗液、EA50染液，其中：每400毫升B.S液是由甲醇320.0毫升，甲醛60.0毫升，冰乙酸20.0毫升配制而成；每210毫升染色液包括：硫肼100.00毫克，叔丁醇液87.0毫升，5mol/L盐酸5.2毫升，1800毫克亚硫酸氢钠，余量为蒸馏水；每200毫升漂洗液包括：偏重亚硫酸钠1.0克，5mol/L盐酸2.0毫升，蒸馏水198.0毫升；每600毫升EA50染液包括：15毫升纯净水，亮绿0.3克，水溶性曙红Y2克，95％乙醇450毫升，纯甲醇125毫升，冰醋酸10毫升，磷钨酸1克；第2步，检测细胞核以测定DNA含量，并且测量细胞的形态学参数；第3步，根据细胞的形态学特征参数、DNA含量及其它细胞核特征参数给出检测报告。