一种基于结构开关型适配体的高灵敏无标记荧光检测方法

摘要

本发明涉及一种对离子、蛋白质和小分子的进行无标记荧光检测的方法。本方法利用了在靶标存在时，靶标能与适配体结合，使适配体折叠成二级结构，而这些二级结构都比未折叠的适配体更难被核酸酶降解。酶切反应后剩余的适配体的量与靶标的浓度成正比。剩余适配体的量可通过核酸染料SYBR Gold来定量，这种荧光染料只染核酸链，对酶切反应后的产物没有染色效果。利用荧光光度计扫描样品，并对荧光强度进行分析，通过荧光信号的变化，实现对靶标的检测。样品中靶标的浓度越高，荧光信号越强。该方法可用于多种靶标的检测，如：K+、凝血酶、可卡因等，并且可用于高通量和多通道的检测中，可实现对靶标的低成本、高灵敏、准确、快速的检测。

主权项

一种无标记荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：A、提供一种结构开关型适配体探针，该结构开关型适配体与待测样品中的靶标结合，并折叠为比未折叠的适配体更难被核酸酶降解的二级结构；B、对待测样品进行核酸酶酶解反应；C、在待测样品中加入核酸染料对未折叠适配体进行染色并检测荧光信号。