一种沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒及其检测方法，本发明的试剂盒包括Bst DNA聚合酶，缓冲液，dNTPs，甜菜碱，硫酸镁，显色液，稳定液和阳性对照，还包括以沙门氏菌AgfA基因，志贺氏菌的ipaH基因为靶基因、基于环介导恒温扩增技术设计的各两对引物：内引物FIP/BIP和外引物F3/B3。本发明的沙门氏菌与志贺氏菌检测试剂盒检测效果更全面、特异性高、漏检率低，适用于食品从业人员体检中沙门氏菌，志贺氏菌的快速检测。

主权项

一种沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒，包括Bst DNA聚合酶，缓冲液，dNTPs，甜菜碱，硫酸镁，显色液，稳定液和阳性对照，其特征在于：还包括以沙门氏菌AgfA基因，志贺氏菌的ipaH基因为靶基因、基于环介导恒温扩增技术设计的各两对引物：内引物FIP/BIP和外引物F3/B3；其中，沙门氏菌，志贺氏菌的两对内外引物序列分别为：沙门氏菌属AgfA‑9‑F3：AGTTTCTGGCAGTGCTGTG  SEQ ID NO 1AgfA‑9‑B3：AGTACTGTTATCCGCACCCT  SEQ ID NO 2AgfA‑9‑FIP：ATCCGGGCCGGAACTATTGCTTTTCTGGCGTCGTTCCACAAT  SEQ ID NO 3AgfA‑9‑BIP：CGCTTGCTCTGCAAAGCGATGTTTTACCATAACCGCTCTGGGT  SEQ ID NO 4或AgfA‑56‑F3：CCCGGATTCCACGTTGAG  SEQ ID NO 5AgfA‑56‑B3：TCGGAGTTTTTAGCGTTCCA  SEQ ID NO 6AgfA‑56‑FIP：CCGCTCTGGGTAATGGTCGTTTTTTCTAACGCTGCGCTTGCTC  SEQ ID NO 7AgfA‑56‑BIP：ATGTAGGCCAGGGTGCGGATATTTTTGGTCGATGGTGGCATTG  SEQ ID NO 8或AgfA‑19‑F3：AGTTTCTGGCAGTGCTGTG  SEQ ID NO 9AgfA‑19‑B3：AGTACTGTTATCCGCACCCT  SEQ ID NO 10AgfA‑19‑FIP：ATCCGGGCCGGAACTATTGC CTGGCGTCGTTCCACAAT  SEQ ID NO 11AgfA‑19‑BIP：CGCTTGCTCTGCAAAGCGATG ACCATAACCGCTCTGGGT  SEQ ID NO 12或AgfA‑156‑F3：CCCGGATTCCACGTTGAG  SEQ ID NO 13AgfA‑156‑B3：TCGGAGTTTTTAGCGTTCCA  SEQ ID NO 14AgfA‑156‑FIP：CCGCTCTGGGTAATGGTCGT TCTAACGCTGCGCTTGCTC  SEQ ID NO 15AgfA‑156‑BIP：ATGTAGGCCAGGGTGCGGATAT GGTCGATGGTGGCATTG  SEQ ID NO 16志贺氏菌属ipaH‑69‑F3：ACATGAAGAGCAYGCCAACA其中Y代表C或T SEQ ID NO 17ipaH‑69‑B3：TCCTCACAGCTCTCAGTGG  SEQ ID NO 18ipaH‑69‑FIP：CGGAATCCGGAGGTATTGCGTGTTTTCCTTTTCCGCGTTCCTTGA  SEQ ID NO 19ipaH‑69‑BIP：GGTCGCTGCATGGCTGGAAATTTTGCAGCAACAGCGAAAGACT  SEQ ID NO 20或ipaH‑169‑F3：ACATGAAGAGCAYGCCAACA其中Y代表C或T SEQ ID NO 21ipaH‑169‑B3：TCCTCACAGCTCTCAGTGG  SEQ ID NO 22ipaH‑169‑FIP：CGGAATCCGGAGGTATTGCGTG CCTTTTCCGCGTTCCTTGA  SEQ ID NO 23ipaH‑169‑BIP：GGTCGCTGCATGGCTGGAAA GCAGCAACAGCGAAAGACT  SEQ ID NO 24。