人乳腺癌基因分型实时荧光定量PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种人乳腺癌基因分型实时荧光定量PCR检测方法，以人乳腺癌基因ERα（SEQID9）、PR（SEQID10）、HER-2（SEQID11）作为扩增的靶基因序列，以18SrRNA（SEQID12）作为内参基因，分别设计与所述ERα、PR、HER-2、18SrRNA基因相对应的特异性引物，采用实时荧光定量PCR方法检测待测样品和对照样品的CT值，计算靶基因表达量；利用ΔΔCT法对靶基因表达量进行分析，所述靶基因表达量=2-ΔΔCT，ΔΔCT=(CT,target-CT,18S)(detected)-(CT,target-CT,18S)(control)；当所述靶基因表达量≤1时，所述ERα、PR、HER-2基因为阴性分型；当所述靶基因表达量＞1时，所述ERα、PR、HER-2基因为阳性分型。本发明操作简便，检测灵敏度高，检测时间短，特异性、重复性好，结果准确可靠，可定性、定量检测，可用于一般人群或乳腺癌患者的基因分型鉴定，为乳腺癌患者提供了个性化用药的重要理论指标，对乳腺癌患者预后具有重要意义，具有很强的推广性和实用性。

主权项

一种人乳腺癌基因分型实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，所述方法是以人乳腺癌相关基因ERα（SEQ  ID 9）、PR（SEQ  ID 10）、HER‑2（SEQ  ID 11）作为扩增的靶基因序列，以18S rRNA（SEQ  ID 12）作为内参基因，分别设计与所述ERα、PR、HER‑2、18S rRNA基因相对应的特异性引物，采用实时荧光定量PCR方法检测待测样品和对照样品的CT值，计算靶基因表达量；利用ΔΔCT法对靶基因表达量进行分析，所述靶基因表达量=2‑ΔΔCT，ΔΔCT= ( CT,target‑ CT,18S)(detected)‑ ( CT,target‑ CT,18S)(control) ；当所述靶基因表达量≤1时，所述ERα、PR、HER‑2基因为阴性分型；当所述靶基因表达量＞1时，所述ERα、PR、HER‑2基因为阳性分型。