鲫鱼IgM提取纯化工艺

摘要

本发明涉及鲫鱼IgM提取纯化工艺，一种将鲫鱼IgM从鲫鱼血清中与其它化合物相分离，从而获得高纯度鲫鱼IgM的方法。包括制备鲫鱼血清；通过33%到50%饱和硫酸铵分级沉淀法对鲫鱼血清进行粗提；通过Macro-prephighQ强阴离子交换柱从鲫鱼血清饱和硫酸铵分离沉淀提取物中进一步提取鲫鱼IgM；经离子交换层析获得的样品进一步通过SephacrylTMS-300葡聚糖凝胶层析柱进行精细分离纯化。从5mL鲫鱼血清（蛋白浓度60mg/mL)中纯化得到4.4mgIgM，得率为1.4%，经SDS-PAGE检测、蛋白扫描仪分析，纯度达96%以上。

主权项

一种鲫鱼IgM提取纯化的工艺，包括：1）制备鲫鱼血清；2）对鲫鱼血清采用饱和度为33%的硫酸铵溶液沉淀后，弃沉淀留上清；再对上清采用饱和度为50%的硫酸铵溶液沉淀后，弃上清留沉淀；3）通过强阴离子交换柱Macro‑prep high Q Cartridge从鲫鱼血清饱和硫酸铵分离沉淀的提取物中进一步提取鲫鱼IgM；4）经离子交换层析获得的样品进一步通过葡聚糖凝胶层析柱SephacrylTM S‑300进行精细分离纯化，所制得的鲫鱼IgM重链和轻链分子量分别约为79.2kDa和25.5kDa。